毛細(xì)管電泳(capillary electrophoresis，CE)是 80 年代初發(fā)展起來的一種基于待分離物組份間淌度和分配行為差異而實現(xiàn)分離的電泳新技術(shù)。具有快速、高效、分辨率高、重復(fù)性好、易于自動化等優(yōu)點。質(zhì)譜分析技術(shù)(MS)是通過對樣品離子的質(zhì)量和強(qiáng)度的測定進(jìn)行定量和結(jié)構(gòu)分析的一種分析方法。具有分析靈敏度高、速度快等優(yōu)點。這兩種技術(shù)的聯(lián)用 (CE/ MS)綜合二者優(yōu)點成為分析生物大分子物質(zhì)的有力工具。本文對近年來 CE/ MS中的接口及樣品預(yù)濃縮技術(shù)作一綜述。
1 儀器結(jié)構(gòu)
任何一種類型質(zhì)譜儀諸如傅立葉變換離子回旋加速共振質(zhì)譜(FT-ICR) 、飛行時間質(zhì)譜、離子陷阱質(zhì)譜和三級四極桿質(zhì)譜等均可與 CE聯(lián)用，但四極桿質(zhì)譜與 CE 聯(lián)用最常見。在各種 CE與質(zhì)譜聯(lián)用中，區(qū)帶毛細(xì)管電泳(CZE) 最常用。其它如毛細(xì)管等電聚焦電泳、膠束電動毛細(xì)管色譜、毛細(xì)管凝膠電泳、毛細(xì)管等速電泳等應(yīng)用較少。電子噴霧離子化 (Electro-sprayIonization， ESl) 是質(zhì)譜首選的離子源。其理由有二 ： ESI 可用于檢測多種高質(zhì)量的帶電分子;其次，從 CE 分離出來的分子經(jīng)過接口可以直接進(jìn)入質(zhì)譜儀。
2 接口技術(shù)
CE末端接口是影響整個檢測的一個關(guān)鍵因素，所有 CE/ESI-MS 接口的目標(biāo)都是為了獲得穩(wěn)定的霧流 (Spray-Current)和高效的離子化。由于 CE需要較高離子強(qiáng)度、揮發(fā)性低的緩沖液，而 ESI需要相對較低的鹽濃度才能獲得好的霧化及離子化。因此接口技術(shù)必須優(yōu)化，使其盡可能提供好的電子接觸，同時盡量減少對 CE分離效率的影響。此外，對于每一種接口應(yīng)選擇相應(yīng)的緩沖液。CE/ ESI-MS 接口共有三種類型：同軸液體鞘流(Coaxial Liquid Sheath Flow) 、無鞘接口、液體連接。
2.1 同軸液體鞘流 此種類型接口是最常見的連接 CE 與ESI-MS 的方法。該接口是一個同心的不銹鋼毛細(xì)管套在電泳毛細(xì)管末端，鞘內(nèi)充有鞘液。再在此不銹鋼套外再套一個同心的鋼套，鞘內(nèi)通鞘氣。鞘液與毛細(xì)管電泳緩沖液液體在尖端混合，同時被鞘氣霧化。鞘液流量通常為每分鐘納升至數(shù)微升之間，但卻顯著高于 CE 流速。由于鞘液的稀釋作用，霧流穩(wěn)定性得到改善。理想的鞘液緩沖液鹽濃度應(yīng)在高分離 (高鹽濃度)和高霧化(低鹽濃度)間優(yōu)化。由于鞘液在霧化過程中也完全蒸發(fā)，鞘液的稀釋并不顯著降低檢測靈敏度。但混合液體的體積應(yīng)盡可能小，以避免譜帶展寬。
