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第八屆圖書(shū)館論壇 校體購(gòu)2

細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)——無(wú)菌操作環(huán)境

教育裝備采購(gòu)網(wǎng) 2016-08-05 10:01 圍觀778次

  組織培養(yǎng)(Tissue culture)是在體外模擬體內(nèi)生理環(huán)境,在無(wú)菌、適當(dāng)溫度和一定營(yíng)養(yǎng)條件下。使從體內(nèi)取出的組織生存、生長(zhǎng)繁殖和傳代,并維持原有的結(jié)構(gòu)和功能特性。廣義的組織培養(yǎng)與體外培養(yǎng)同義。體外培養(yǎng)(Invitro)包括所有結(jié)構(gòu)層次的培養(yǎng),即:組織培養(yǎng)、細(xì)胞培養(yǎng)和器官培養(yǎng)。

  所謂細(xì)胞培養(yǎng)(Cell culture)是指細(xì)胞包括單個(gè)細(xì)胞在體外條件的生長(zhǎng)。 組織培養(yǎng)的發(fā)展史已有近百年,最初的組織培養(yǎng)是胚胎學(xué)和微生物學(xué)的引申,建立于無(wú)菌原則上,用天然體液(如胎汁、血漿)來(lái)維持從整體切下的組織塊,對(duì)細(xì)胞進(jìn)行形態(tài)和功能的觀察。

  組織細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)與其他一般實(shí)驗(yàn)室工作的主要區(qū)別在于要求保持無(wú)菌操作,避免微生物及其他有害因素的影響。目前,超凈工作臺(tái)的廣泛使用,很大程度上方便了組織細(xì)胞培養(yǎng)工作,并使一些常規(guī)實(shí)驗(yàn)室有可能用于進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。上海創(chuàng)賽提供:60x15mm細(xì)菌培養(yǎng)皿,帶蓋,三出口,商品編號(hào):R01-66-1560-60x15mm?,價(jià)格374元。

  細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)能進(jìn)行六方面的工作:無(wú)菌操作、孵育、制備、清洗、消毒滅菌處理、儲(chǔ)藏。

  無(wú)菌操作區(qū)

  (1)無(wú)菌操作室:

  無(wú)菌操作區(qū)只限于細(xì)胞培養(yǎng)及其他無(wú)菌操作的區(qū)域,最好能與外界隔離,不能穿行或受其他干擾。

  理想的無(wú)菌操作室應(yīng)劃為三部分:

  a) 更衣室—―供更換衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。

  b) 緩沖間—―位于更衣間與操作間之間,目的是為了保證操作間的無(wú)菌環(huán)境,同時(shí)可放置恒溫培養(yǎng)箱及某些必需的小型儀器。

  c) 無(wú)菌操作間—―專(zhuān)用于無(wú)菌操作、細(xì)胞培養(yǎng)。其大小要適當(dāng),且其頂部不宜過(guò)高(不超過(guò)2.5m)以保證紫外線的有效滅菌效果;墻壁光滑無(wú)死角以便清潔和消毒。上海創(chuàng)賽提供:9.0CM一次性細(xì)胞培養(yǎng)皿,平底滅菌,適合細(xì)胞貼壁生長(zhǎng),商品編號(hào):C81-TCD010090-10個(gè)/包,價(jià)格16.8元。

  工作臺(tái)安置不應(yīng)靠墻壁,臺(tái)面要光滑壓塑作表面,漆成白色或灰色以利于解剖組織及酚紅顯示pH的觀察。

  無(wú)菌操作間的空氣消毒:紫外線燈—-產(chǎn)生臭氧,并且室內(nèi)溫度及濕度均較高,不利于工作人員健康。

  空氣過(guò)濾的恒溫恒濕裝置—-最好。

  潔凈室(區(qū))空氣潔凈度級(jí)別表潔凈度級(jí)別:

  塵粒最大允許數(shù)/立方米 100級(jí) 3,500 0 5 110000級(jí)

  微生物最大允許數(shù) 350,000 2,000 100 3100000級(jí)

  浮游菌/立方米 3,500,000 20,000 500 10300000級(jí)

  沉降菌/皿 10,350,000 60,000 - 15

  無(wú)臭氧紫外線消毒器電子消毒滅菌器—-在高壓電場(chǎng)作用下,電子管的內(nèi)外電極發(fā)生強(qiáng)烈電子轟擊,使空氣電離而將空氣中的氧轉(zhuǎn)換成臭氧。臭氧是一種強(qiáng)氧化劑,能同細(xì)菌的胞膜及酶蛋白氫硫基進(jìn)行氧化分解反應(yīng),從而靠臭氧氣體彌漫性擴(kuò)散達(dá)到殺菌之目的,消毒時(shí)沒(méi)有死角。消毒后空間的殘留臭氧只需30~40min即能自行還原成氧氣,空氣不留異味,消毒物體表面不留殘毒。

  (2)凈化工作臺(tái):

  操作簡(jiǎn)單,安裝方便,占用空間小且凈化效果很好。

  一般細(xì)菌培養(yǎng)室使用的凈化工作臺(tái)主要有兩種:

  a)側(cè)流式或稱(chēng)垂直式

  b)外流式或稱(chēng)水平層流式。

  凈化工作臺(tái)工作原理(大致相同)—-通常是將室內(nèi)空氣經(jīng)粗過(guò)濾器初濾,由離心風(fēng)機(jī)壓入靜壓箱,再經(jīng)高效空氣過(guò)濾器精濾,由此送出的潔凈氣流以一定的均勻的斷面風(fēng)速通過(guò)無(wú)菌區(qū),從而形成無(wú)塵無(wú)菌的高潔凈度工作環(huán)境。

  側(cè)流式工作臺(tái)—-空氣凈化后的氣流由左或右側(cè)通過(guò)工作臺(tái)面流向?qū)?cè),也有從上向下或從下向上流向?qū)?cè),形成氣流屏障保持工作區(qū)無(wú)菌。工作臺(tái)結(jié)構(gòu)為封閉式。外流式(水平式)工作臺(tái)—-凈化后的空氣面向操作者流動(dòng),因而外方氣流不致混入操作,但進(jìn)行有害物質(zhì)實(shí)驗(yàn)操作則對(duì)操作者不利。工作臺(tái)結(jié)構(gòu)為開(kāi)放式(已少用)。

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