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第八屆圖書館論壇 校體購2

可用于診斷的DNA實時檢測方法問世

教育裝備采購網(wǎng) 2016-09-13 09:43 圍觀505次

  聚合酶鏈反應(PCR)是分子生物學擴增DNA片段的簡單和無處不在的方法。該項技術(shù)非常重要,不僅用于基礎(chǔ)研究,而且也在診斷,法醫(yī)和醫(yī)療中應用。定量實時PCR是一個修改后的版本,通過并入熒光標記來累積地測量DNA擴增,而不是在過程結(jié)束時進行檢測,如在常規(guī)PCR中那樣。因此實時PCR對初始的DNA模板的量敏感,實現(xiàn)定量。然而,目前的技術(shù)因序列的錯誤,不準確結(jié)合,或熒光探針(雜交)的不平等結(jié)合等引進偏差。

  一個名古屋大學研究小組現(xiàn)已發(fā)展了測量實時DNA擴增的一個新穎的方法,該方法是無標記的,從而避免了與其它操作相關(guān)的誤差。研究及其成果發(fā)表于《科學報告》中。

  現(xiàn)有無標記檢測系統(tǒng)依賴于靶分子的表面固定化,這是昂貴、費力和無效率的。這種新方法也引入互補探針結(jié)合的雜交偏差的元件。新的技術(shù)檢測穿過微小200納米(0.0002毫米)-寬填充有分析試料的納通道液體的激光束的強度的變化。532納米的激光束由透鏡聚焦,然后衍射通過穿過納米通道由光電二極管檢測到。二氧化硅基片用來制作納米通道,較大的樣品液體和二氧化硅的折射率之間的差,較小的是在衍射光強度的變化,并且反之亦然。

  “我們使用這種技術(shù)進行了人類乳頭狀瘤病毒和肺結(jié)核細菌的第一次無標簽檢測,”第一作者隆夫安井說。 “該方法是高度敏感的,并且允許一個寬范圍的初始DNA濃度的定量,從1fM至1pM(1000倍范圍),所以是優(yōu)于現(xiàn)有的基于熒光的檢測系統(tǒng)。”

  “我們的系統(tǒng)在34℃的相對低的溫度下進行且無需熱循環(huán)測定DNA擴增”,合著者宣忠梶說。 “因為它有可能被構(gòu)造為單個芯片,并且可以檢測小體積樣品為1微升,它比傳統(tǒng)的探測器少100-1,000倍,它是特別適合于發(fā)展作為小型化診斷和微生物的檢測。”

來源:來寶網(wǎng) 責任編輯:云燕 我要投稿
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