蔬菜水果中氯吡脲的檢測——SPE-UPLC-MS/MS法解決方案
氯吡脲是一種新型的植物生長調(diào)節(jié)劑，被廣泛應用于蘋果、西紅柿、黃瓜、西瓜等水果和蔬菜生產(chǎn)，以促進果實肥大、提高產(chǎn)量、保鮮等。我國規(guī)定西瓜、黃瓜中氯吡脲最高殘留限量為 0.1 mg/kg，獼猴桃、葡萄中氯吡脲最高殘留限量為 0.05 mg/kg，而其它水果、蔬菜中氯吡脲最高殘留限量尚未制定標準。
方法優(yōu)勢
迪馬科技技術實驗室建立了蔬菜水果中氯吡脲殘留量的檢測方法：
(1) 采用乙腈提取，ProElut NH2固相萃取柱凈化，UPLC-MS/MS檢測;
(2) 具有前處理簡單，回收率高，除雜效果明顯、方法重現(xiàn)性好等優(yōu)點;
(3) 方法定量限4.0 μg/kg。
蔬菜水果中氯吡脲的檢測——SPE-UPLC-MS/MS法
1、適用范圍
本方案適用于黃瓜、蘋果和西紅柿中氯吡脲的檢測。方法定量限是4.0 μg/kg。
2、 標準品配制
(1) 氯吡脲儲備液1.0 mg/mL，準確稱取氯吡脲原藥，用甲醇配制成1.0 mg/mL的儲備液。
(2) 中間液混標0.5 μg/mL，吸取一定體積氯吡脲儲備液，用甲醇配制成0.5 μg/mL的中間液。
3、提取
(1) 稱取5.0 g樣品，加入20 mL乙腈，振蕩5 min，加入3 g NaCl，振蕩5 min，6000 rpm下離心2 min;
(2) 取10 mL上清液于10 mL氮吹管中，將上清液50 ℃水浴條件下氮吹至干;
(3) 向氮吹管中加入1 mL 1%氨水，渦旋至完全溶解，加入5 mL二氯甲烷，渦旋2 min，4000 rpm離心
2 min，取下層清液待凈化。
4、凈化—— ProElut NH2 500 mg/6 mL(Cat.# 63305)
(1)活 化：
依次用5 mL甲醇、5 mL二氯甲烷活化;
(2)上 樣：
加入待凈化液，棄去流出液;
(3)淋 洗：
加入5 mL二氯甲烷，棄去流出液;
(4)洗 脫：
加入5 mL 30%甲醇二氯甲烷溶液，收集流出液;
(5)重新溶解：
將洗脫液在50 ℃下氮吹至干，用乙腈定容至1 mL，上機分析。
5、色譜條件
UPLC 條件：
色譜柱：Leapsil C18 100 × 2.1 mm 2.7 μm (Cat.# 86005)
流 速：0.3 mL/min
進樣量：5 μL
柱 溫：35 ℃
流動相：乙腈：0.1%甲酸水=4:6
質(zhì)譜條件：
|
電離模式：ESI |
掃描方式：正離子掃描 |
|
檢測方式：多反應監(jiān)測 |
電噴霧電壓：5500 V |
|
霧化氣壓力：50 psi |
輔助氣壓力：50 psi |
|
氣簾氣壓力：20 psi |
離子源溫度：500 ℃ |
定性離子對、定量離子對、碰撞氣能量及去簇電壓見下表
表1 氯吡脲的定性離子對、定量離子對、去簇電壓、碰撞氣能量
|
藥物名稱 |
定性離子對 |
定量離子對 |
碰撞氣能量/eV |
去簇電壓/V |
|
（m/z） |
（m/z） |
|||
|
(母離子/子離子) |
(母離子/子離子) |
|||
|
氯吡脲 |
248.0/128.9 |
248.0/128.9 |
24.57 |
63 |
|
248.0/154.9 |
19.81 |
|||
|
248.0/94.1 |
21.28 |
6、添加回收結果
表2 蔬菜和水果中氯吡脲檢測的添加回收結果
|
|
回收率（%） |
||
|
添加濃度為4.0 μg/kg，加標量：0.5 μg/mL，加40 μL |
|||
|
黃瓜 |
西紅柿 |
蘋果 |
|
|
氯吡脲 |
90.70 |
97.16 |
86.10 |
蔬菜水果中氯吡脲的檢測——SPE-UPLC-MS/MS法相關產(chǎn)品信息
|
貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
|
樣品前處理 |
||
|
63305 |
ProElut NH2 |
500 mg/6 mL 30/pk |
|
244358 |
12管防交叉污染真空SPE萃取裝置 |
12位 |
|
4803 |
1,3,6 mL柱管通用連接器 |
15/pk |
|
4806 |
考克(控制流量) |
15/pk |
|
99011 |
真空/正壓兩用泵，無油 |
1/pk |
|
99013 |
抽濾瓶套裝 (包括硅橡膠管2米, 2 L抽濾瓶及橡膠塞) |
1/pk |
|
30039 |
FitMax針頭式過濾器 Nylon |
13 mm, 0.22 μm 100/pk |
|
30040 |
FitMax針頭式過濾器 Nylon |
13 mm, 0.45 μm 100/pk |
|
色譜柱及保護柱 |
||
|
86005 |
Leapsil C18 UHPLC/HPLC兼容反相色譜柱 |
100 x 2.1 mm，2.7 μm |
|
12-S-12010A1-1ML |
氯吡脲[68157-60-8] |
100 μg/mL溶于乙腈1 mL |
|
HPLC溶劑?緩沖鹽?離子對試劑 |
||
|
50102 |
甲醇 HPLC級 |
4 L |
|
50101 |
乙腈 HPLC級 |
4 L |
|
50117 |
二氯甲烷 HPLC級 |
4 L |
|
50144 |
甲酸 HPLC級 |
50 mL |
|
通用色譜產(chǎn)品 |
||
|
52401B |
瓶架/藍色 |
50孔 |
|
52401A |
瓶架/白色 |
50孔 |
|
1034 |
樣品瓶（棕色/螺紋） |
2 mL, 100/pk |
|
1035 |
樣品瓶蓋/含墊（已經(jīng)組裝） |
100/pk |
|
H80465 |
HPLC 進樣針 |
25 μL |
紅色產(chǎn)品貨號#30039、#30040、#1034、#1035火熱促銷中
