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透析袋原理介紹及使用方法步驟

教育裝備采購(gòu)網(wǎng) 2020-09-18 09:04 圍觀2350次

  自1861年發(fā)明透析方法至今已有一百多年。透析已成為生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室最簡(jiǎn)便最常用的分離純化技術(shù)之一。在生物大分子的制備過(guò)程中,除鹽、除少量有機(jī)溶劑、除去生物小分子雜質(zhì)和濃縮樣品等都要用到透析的技術(shù)。通常是將半透膜制成袋狀,將生物大分子樣品溶液置入袋內(nèi),將此透析袋浸入水或緩沖液中,樣品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋內(nèi)。

  下面分別介紹透析袋和透析膜使用方法和步驟透析袋使用前處理方法:

  1.把透析袋剪成適當(dāng)長(zhǎng)度(10-20cm)的小段。

  2. 在大體積的2%(W/V)碳酸氫鈉和 10mmol/L EDTA(pH8.0)中將透析袋煮沸10分鐘。

  3. 用蒸餾水徹底清洗透析袋。

  4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中將之煮沸10分鐘。

  5.冷卻后,存放于4度,必須確保透析袋始終浸沒(méi)在溶液內(nèi)。從此時(shí)起取用透析袋是必須戴手套。

  6. 用前在透析袋內(nèi)裝滿水然后排出,將之清洗干凈。

  透析膜使用前處理方法:

  1. 戴手套把透析膜剪成適當(dāng)長(zhǎng)度,浸在蒸餾水中 15 min 泡軟。

  2. 浸入 10 mM sodium bicarbonate 中,并加熱至 80℃,一邊攪拌至少 30min。

  3. 換到 10 mM Na2ull;EDTA 中浸泡 30 min,以新鮮的 EDTA 同樣方法處理三次。

  4. 再用 80℃ 蒸餾水洗 30 min,然后換到 20% 酒精中,放在 4℃冰箱中保存。

  透析的動(dòng)力是擴(kuò)散壓,擴(kuò)散壓是由橫跨膜兩邊的濃度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶質(zhì)在膜內(nèi)外兩邊的濃度梯度,還正比于膜的面積和溫度,通常是4℃透析,升高溫度可加快透析速度。通常在試驗(yàn)前需要確定透析袋的截留分子量。

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