表達(dá)木質(zhì)素過(guò)氧化物酶的大腸桿菌工程菌、制備方法及其應(yīng)用

　　摘要：本發(fā)明涉及一種大腸桿菌工程菌，本發(fā)明還提供一種大腸桿菌工程菌的制備方法，步驟是克隆黃孢原毛平革菌木質(zhì)素過(guò)氧化物酶的基因的cDNA，雙酶切上述cDNA，將酶切片段連接pCold-TF載體,鑒定得到的質(zhì)粒pCold-TF-LiP是否陽(yáng)性表達(dá)，將陽(yáng)性質(zhì)粒pCold-TF-LiP導(dǎo)入至大腸桿菌BL21感受態(tài)細(xì)胞中，獲得表達(dá)木質(zhì)素過(guò)氧化物酶的大腸桿菌工程菌，本發(fā)明還提供大腸桿菌工程菌的應(yīng)用，方法是將大腸桿菌工程菌接種于液體培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基中加入氨芐青霉素，培養(yǎng)至OD₆₀₀為0.58～0.62，加入蛋白誘導(dǎo)劑IPTG，誘導(dǎo)重組蛋白表達(dá)，本發(fā)明的大腸桿菌工程菌表達(dá)量高，活性極強(qiáng)，酶活為3528?U/L。

專利類型發(fā)明專利
申請(qǐng)人湖南大學(xué);
發(fā)明人陳明;晏銘;曾光明;杜長(zhǎng)青;張嘉超;魯倫慧;朱藝;賴萃;許飄;武海鵬;
地址410082 湖南省長(zhǎng)沙市河西岳麓山湖南大學(xué)環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院
申請(qǐng)?zhí)?/b>CN201310544399.5

申請(qǐng)時(shí)間2013年11月06日

申請(qǐng)公布號(hào)CN103540606B

申請(qǐng)公布時(shí)間2015年09月23日

分類號(hào)C12N15/70(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12N9/08(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N;

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表達(dá)木質(zhì)素過(guò)氧化物酶的大腸桿菌工程菌、制備方法及其應(yīng)用

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