摘要：本發(fā)明公開了一套檢測(cè)小鼠腸道分節(jié)絲狀菌SFB鞭毛蛋白的方法與應(yīng)用，包括PCR方法、蛋白質(zhì)變性電泳與免疫印跡方法(SDS?PAGE?Western?blotting)、細(xì)菌原位雜交結(jié)合免疫組化方法(FISH+IHC)。所述PCR方法為，設(shè)計(jì)合成了一對(duì)能特異性擴(kuò)增SFB鞭毛蛋白Flic3基因的引物，使用該引物對(duì)樣品DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增后，可以在凝膠電泳后檢測(cè)到與Flic3基因片段大小一致的DNA條帶。所述蛋白質(zhì)變性電泳與免疫印跡方法為，成功制備了兔抗SFB?Flic3鞭毛蛋白的多克隆抗體，并可以使用該蛋白對(duì)樣品中是否存在SFB?Flic3鞭毛蛋白進(jìn)行檢測(cè)。所述細(xì)菌原位雜交結(jié)合免疫組化方法為使用SFB16S?rRNA基因特異常性探針和兔抗SFB?Flic3鞭毛蛋白多克隆抗體檢測(cè)SFB鞭毛蛋白的表達(dá)情況、SFB細(xì)菌的形態(tài)及SFB與腸上皮的相互作用情況。本發(fā)明所涉及的檢測(cè)方法具有快速、直觀和表象的優(yōu)點(diǎn)。
- 專利類型發(fā)明專利
- 申請(qǐng)人浙江大學(xué);浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院;
- 發(fā)明人陳華海;尹業(yè)師;王欣;項(xiàng)春生;
- 地址310012 浙江省杭州市西湖區(qū)余杭塘路866號(hào)
- 申請(qǐng)?zhí)?/b>CN201610579365.3
- 申請(qǐng)時(shí)間2016年07月19日
- 申請(qǐng)公布號(hào)CN106011281A
- 申請(qǐng)公布時(shí)間2016年10月12日
- 分類號(hào)C12Q1/68(2006.01)I;G01N33/68(2006.01)I;G01N27/62(2006.01)I;
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