關(guān)于膠囊鉻超標(biāo)事件的檢測(cè)方法

　　適應(yīng)范圍：

　　本指導(dǎo)原則由APL微波消解儀廠家提供：適用于2012年明膠藥用空心膠囊殼中鉻檢測(cè)的應(yīng)急檢驗(yàn)。

　　1、檢驗(yàn)樣品：

　　膠囊劑(由明膠、空心膠囊殼裝載的膠囊)。

　　2、檢驗(yàn)項(xiàng)目：

　　明膠空心膠囊中的鉻。

　　3、檢驗(yàn)方法：

　　《中國(guó)藥典》2010年版(二部)明膠空心膠囊項(xiàng)下鉻檢查項(xiàng)(P1204)、附錄IV D 原子吸收分光光度法(附錄24)、附錄I E 膠囊劑裝量差異項(xiàng)。

　　4、儀器

　　4.1 原子吸收分光光度計(jì)(含石墨爐原子化裝置)

　　4.2電子天平

　　4.3 微波消解儀

　　4.4 電熱板或其他趕酸設(shè)備，如：恒溫消解儀、趕酸器等。

　　5、試劑

　　5.1 硝酸(優(yōu)級(jí)純)

　　5.2 鉻單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))

　　6、空心膠囊殼的制備：

　　傾出膠囊劑的內(nèi)容物，膠囊殼用棉棒或小刷試凈(不得損壞囊殼)，放置，待用。

　　7、膠囊劑中明膠空心膠囊殼中總鉻測(cè)定方法：

　　7.1鉻標(biāo)準(zhǔn)貯備液的制備：取鉻單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)，用2%硝酸稀釋制成每1ml含鉻1.0μg的鉻標(biāo)準(zhǔn)貯備液。

　　7.2標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備：分別精密量取鉻標(biāo)準(zhǔn)貯備液適量，用2%硝酸溶液稀釋制成每1ml含鉻0~80ng的對(duì)照品溶液。臨用時(shí)現(xiàn)配。

　　7.3供試品溶液的制備：精密稱取本品0.5g，置聚四氟乙烯消解罐內(nèi)，加硝酸5~10ml，混勻，浸泡過(guò)夜，蓋上內(nèi)蓋，旋緊外套，置適宜的微波消解。消解完全后，取消解內(nèi)罐置電熱板上緩緩加熱至紅棕色蒸汽揮盡并近干，用2%硝酸轉(zhuǎn)移至50ml量瓶中，并加2%硝酸稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液;同法制備試劑空白溶液，作為空白校正。

　　7.4 測(cè)定： 取供試品溶液與對(duì)照品溶液適量，以石墨爐為原子化器，照原子吸收分光光度法(《中國(guó)藥典》2010年版(二部)附錄IV D第一法)，在357.9nm的波長(zhǎng)處測(cè)定，計(jì)算，即得。

　　8、方法驗(yàn)證：

　　8.1 線性：制備含鉻的對(duì)照品溶液至少5份，濃度依次遞增，最高濃度吸收值應(yīng)在0.8以下，保證具有較好的線性范圍，相關(guān)系數(shù)(r)≥0.99。

　　8.2 準(zhǔn)確性：應(yīng)進(jìn)行整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程的(包括前處理)方法學(xué)回收率驗(yàn)證，暫定回收率應(yīng)為80%-120%的范圍內(nèi)。每次測(cè)定需進(jìn)行隨行回收試驗(yàn)。

　　8.3 重復(fù)性

　　取限度濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液重復(fù)測(cè)定5次，吸收度(測(cè)定值)的變化范圍(RSD)不得過(guò)5%。

　　8.4 定量限

　　本方法定量限應(yīng)不低于0.5mg/kg。

　　9、注意事項(xiàng)：

　　9.1微波消解：樣品前處理是試驗(yàn)中的關(guān)鍵步驟，既要保證消解完全，又要保證消解過(guò)程樣品中的鉻不損失，因此試驗(yàn)中建議加入10ml硝酸(優(yōu)級(jí)純)，并需要浸泡過(guò)夜后消解。參考消解程序?yàn)椋?min由室溫升至120℃，維持3min;6min由120℃升至150℃，維持2min;6min由150℃升至180℃，維持20min。

　　9.2為避免玻璃容器的干擾，試驗(yàn)中宜采用塑料容量瓶(聚丙烯材質(zhì))定容。

　　9.3不同原子吸收儀試驗(yàn)參數(shù)可能不同，可根據(jù)原子吸收儀說(shuō)明書中推薦程序設(shè) 定測(cè)定參數(shù)(參考石墨爐升溫程序如下：5s升溫至100℃，保持10s;5s升溫至500℃，保持10s;0s升溫至2100℃，保持3s;0s升溫至2200℃，保持2s)

　　9.4含TiO2的膠囊殼(不透明膠囊)建議在微波消解時(shí)，樣品中除加硝酸外可另加0.5ml氫氟酸，其他同供試品溶液制備。

　　9.5實(shí)驗(yàn)用水：應(yīng)采用純化水，儲(chǔ)藏水的容器宜用聚丙烯塑料材料制成，不宜選用玻璃容器長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

　　9.6 試劑應(yīng)采用優(yōu)級(jí)純及以上級(jí)別試劑。

　　9.7試驗(yàn)中所用容器及器皿均需在每次使用前用鹽酸溶液(濃鹽酸：水/1:1)浸泡1h，再用硝酸溶液(濃硝酸：水/1:1)浸泡1h，再用純化水沖洗干凈后使用。微波消解容器應(yīng)采用儀器清洗程序清洗，不得采用鉻酸清洗液洗滌容器。

　　9.8可供選擇的鉻元素標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/mL)由國(guó)家有色金屬及電子材料分析測(cè)試中心提供(電話：010-82241362;傳真：010-82241346);也可以由中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院提供(電話：010-64525678-4703)。鉻對(duì)照貯備溶液應(yīng)密封，冷暗處保存。

　　9.9 結(jié)果判斷：標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定不得過(guò)百萬(wàn)分之二(2mg/kg)。由于微量測(cè)定，結(jié)果的偏差會(huì)較大，一般兩份樣品的相對(duì)偏差≤10%，取平均值即可。

　　9.10 樣品檢測(cè)應(yīng)嚴(yán)格遵守《中國(guó)藥典》2010年版(二部)“明膠空心膠囊”鉻項(xiàng)下方法試驗(yàn)，如因試驗(yàn)需要改變樣品前處理方法及檢測(cè)波長(zhǎng)，應(yīng)按照實(shí)驗(yàn)室有關(guān)質(zhì)量管理程序(偏離)進(jìn)行。

　　9.11若試劑空白溶液測(cè)定值過(guò)高(宜不超過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線最低濃度點(diǎn)吸光度值的50%)，應(yīng)換用空白干擾小的溶液重新試驗(yàn)。

　　9.12 注意試驗(yàn)所需的所有儀器均應(yīng)在計(jì)量檢定合格效期內(nèi)。

　　9.13若供試品溶液濃度過(guò)高，可稀釋到標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)進(jìn)行測(cè)定。

　　9.14 由于硬、軟膠囊殼中含有不同比例的甘油(軟膠囊比例較高，甘油：明膠比例可達(dá)1:2)，在進(jìn)行微波消解時(shí)，甘油可與硝酸產(chǎn)生反應(yīng)，容易爆罐，請(qǐng)注意消解時(shí)的安全監(jiān)控，盡量在前處理時(shí)預(yù)消解。