一些新手朋友在剛做ELISA實(shí)驗(yàn)的時(shí)候總有這樣那樣的問(wèn)題存在，總結(jié)2015年以來(lái)何經(jīng)理整理出了一些新手朋友最常見(jiàn)的幾個(gè)問(wèn)題：
第一個(gè)問(wèn)題：所有孔未顯色?
對(duì)于這個(gè)問(wèn)題可能是一下原因?qū)е碌模?
1、微孔加入抗體后，洗板不徹底，微孔中存在游離的抗體。
2、用錯(cuò)試劑。
3、在操作中忘記加酶或抗體。
相應(yīng)的解決辦法：
1、檢查洗板器械，比如洗板機(jī)管道是否堵塞、洗液是否用完。
2、在加樣前，要看清瓶簽。
3、嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)操作步驟進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，確保每步都到位。
第二個(gè)問(wèn)題：所有孔顯色偏低?
以下的五個(gè)操作錯(cuò)誤事項(xiàng)是致使所有孔顯色偏低的因素：
1、微孔加入抗體后，洗板不徹底，微孔中存在游離的抗體。
2、洗板不干凈。
3、抗體污染了酶結(jié)合物等其它試劑。
4、溫度沒(méi)達(dá)到要求。
5、每孔加入的試劑量低于說(shuō)明書(shū)要求量。
解決辦法：
1、手工加蒸餾水洗板時(shí)，要避免吸頭接觸微孔，常更換新的蒸餾水。
2、洗板時(shí)要確保每孔都注滿(mǎn)蒸餾水(約400ul)，且至少洗板五次。
3、嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)要求操作，每次取樣要更換吸頭。
4、控制孵育溫度在25℃。
5、加樣器吸頭安放牢固避免吸樣不足，加樣時(shí)務(wù)必將吸頭內(nèi)液體打盡。
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