一般情況，我們開始流式實驗時，首先要選擇抗體，必然要涉及到熒光的選擇，盡量使這些熒光的補償值降到最低。

　　1.我們需要了解我們用的流式細胞儀的硬件設(shè)施(激光，濾光片)

　　2.選擇合適的熒光染料，盡量利用到你的儀器上的所有激光，這樣可以使這些熒光交叉可能性達到最小。一般四種顏色或以下的比較好選，常用：FITC,PE,APC,Percp-cy5.5。當然還有其他很多種組合 我們也可以用BD或ebioscience網(wǎng)站上的軟件進行選擇界面有點不同，但基本原理就是設(shè)置好你需要集中顏色，用的是哪臺儀器，幾根激光，軟件就會自動列出合適的染料。

　　3.選擇好熒光染料以后，就是將這些染料與你的抗體聯(lián)系起來，這就要根據(jù)自己實驗的需要了，有些常用的抗體上可能標記有很多種染料，但有些不常用的選擇性就不太多，所以可以先定一些無法選擇的抗體，然后就是根據(jù)表達量少的標記熒光信號強的染料，認為重要的抗體標記熒光信號強的，常用熒光的強弱如下：PE>APC>PE-CY7>Percy-cy5.5>FITC>APC-CY7。

　　4.抗體確定好后，就可以開始預(yù)實驗了：包括樣品的處理，抗體的濃度，時間，這些都需要一定的try。

　　5.正式開始實驗需要做blank/isotype,單染(兩兩調(diào)補償)，復(fù)染(sample)

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