一、原理：過氧化物酶廣泛分布于植物的各個組織器官中。在有過氧化氫存在下，過氧化物酶能使愈創(chuàng)木酚氧化，生成茶褐色物質，此產物在470 nm 處有最大光吸收值，故可通過測470 nm下的吸光度變化測定過氧化物酶的活性。

　　二、實驗材料：植物葉片

　　三、設備與試劑：電子分析天平，分光光度計，低速冷凍多管離心機，研缽，容量瓶，量筒，試管，吸管。

　　(1)100mmol/L 磷酸緩沖液(pH=6.0)：[0.2M的Na2HPO412.3mL和NaH2PO487.7mL混合后稀釋2倍]

　　(2)反應混合液：100mmol/L磷酸緩沖液(pH6.0)50ml于燒杯中，加入愈創(chuàng)木酚28μl，于磁力攪拌器上加熱攪拌，直至愈創(chuàng)木酚溶解，待溶液冷卻后，加入30%過氧化氫19μl，混合均勻，保存于冰箱中。

　　四、操作步驟

　　1.稱取植物材料1g，放入研缽中，適量液氮研磨成粉末，加適量的磷酸緩沖液于研缽中研磨成勻漿，以4000r/min離心15分鐘，上清液轉入100ml容量瓶中，殘渣再用5mL磷酸緩沖液提取一次，上清液并入容量瓶中，定容至刻度，貯于冷處備用。

　　2.取光徑1cm比色杯2只，于1只中加入反應混合液3mL和磷酸緩沖液1mL(或加熱煮沸5 min 的酶液)，作為校零對照，另1只中加入反應混合液3ml，上述酶液1ml(如酶活性過高可稀釋之)，立即開啟秒表記錄時間，于分光光度計上在波長470nm下測量吸光度值，每隔0.5min(30S)讀數一次，連續(xù)讀數3次。

　　五、結果計算： 以每分鐘內A470變化0.01 為1 個過氧化物酶活性單位(U)

　　中文名稱：愈創(chuàng)木酚 CP，>99.0%(GC)

　　英文名稱：Guaiacol CP，>99.0%(GC)

　　品牌：博飛美科

　　貨號：C16-G10224-100g

　　CAS: 90-05-1

　　分子式：C7H8O2

　　分子量：124.14

　　化學性質：白色或微黃色結晶或無色至淡黃色透明油狀液體。有特殊芳香氣味。 略溶于水和苯。易溶于甘油。與乙醇、乙醚、氯仿、油類、冰醋酸混溶。

　　用途：用于醫(yī)藥、染料及香料中間體。用于配制咖啡、香草、熏煙和煙草等型香精。用于染料的合成，也用作分析試劑。在醫(yī)藥上用以制造愈創(chuàng)木酚磺酸鈣，在香料工業(yè)上用以制造香蘭素和人造麝香等。檢驗銅、氫氰酸和亞硝酸鹽。

　　CANSPEC品質提供的愈創(chuàng)木酚，Guaiacol，CP，>99.0%(GC)|90-05-1性能卓越，其優(yōu)秀的品質滿足您不同實驗的多種需求。

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