液相色譜儀的品牌、種類很多，各家的使用方法也不盡一樣，主要看你是那一款的液相色譜儀，當初購買設備時，廠家的工程師會培訓使用方法。高效液相色譜儀與結構儀器的聯用是一個重要的發(fā)展方向。液相色譜-質譜連用技術受到普遍重視，如分析氨基甲酸酯農藥和多核芳烴等;液相色譜-紅外光譜連用也發(fā)展很快如在環(huán)境污染分析測定水中的烴類，海水中的不揮發(fā)烴類，使環(huán)境污染分析得到新的發(fā)展。
液相色譜儀的使用方法：
內容：
1開機
1.1打開電腦。
1.2打開液相色譜各個模塊的電源。
1.3雙擊桌面“儀器—聯機"，進入聯機界面。
1.4排氣：
1.4.1手動旋開泵處沖洗閥(逆時針旋轉約1圈)。
1.4.2右鍵單擊“泵"圖標區(qū)域，選擇“方法?"選項，進入泵編輯畫面，設流速：5ml/min(一般為3-5ml/min)，點擊“確定"。
1.4.3右鍵單擊“泵"圖標，點擊“控制?"選項，選中“ON"，點擊“確定"，則系統(tǒng)開始沖洗，直到管線內(由溶劑瓶到泵入口)無氣泡為止，(一般為5分鐘)，切換通道繼續(xù)沖洗，直到所有要用通道無氣泡為止。
1.4.4右鍵單擊“泵"圖標，點擊“方法?"選項，設流速：0ml/min，手動旋緊沖洗閥。
1.4.5右鍵單擊“泵"圖標，點擊“方法?"選項，按照方法要求選擇合適比例的流動相，設流速：1.0ml/min。
1.4.6同理右鍵單擊“柱溫箱"，“檢測器"圖標，點擊“方法?"選項，按照方法的要求設置溫度，波長，點擊“控制"選項，“ON"打開柱溫箱和檢測器。
2編輯方法
2.1點擊“方法"-“編輯完整方法"開始編輯完整方法。
2.2選中除“數據分析"外的三項，進入下一選項卡。
2.3方法信息：在“方法注釋"中加入方法的信息(如：Thisisfortest!)。進入下一選項卡。
2.4泵參數設定：在“流速"處輸入流量，如1.0ml/min，停止時間：如10min(該停止時間僅為做一個樣品需要的時間)，按照要求選擇合適比例的流動相配比，如乙腈：水=75：25，A為水，B為乙腈，則設置B：75%即可。進入下一選項卡。
2.5自動進樣器參數設定：選擇“洗針進樣"----可以輸入進樣體積和洗瓶位置，進入下一選項卡。
2.6柱溫箱參數設定：在“溫度"下面的空白方框內輸入所需溫度，如：40度。進入下一選項卡。
2.7UV檢測器參數設定：在“波長"下方的空白處輸入所需的檢測波長，如254nm。點擊確定。
2.8在“運行時選項表"中，選中“數據采集"，點擊“確定"。
2.9從“方法"菜單，選中“方法另存為?"，輸入一方法名，如“測試"，點擊“確定。
3單次采集
3.1從“運行控制"菜單中，選擇“樣品信息"選項，選擇合適的路徑，在“數據文件"中選擇“前綴/計數器"，輸入樣品瓶的位置，點擊“確定"。
3.2基線平穩(wěn)后約10分鐘，從“運行控制"菜單中選擇“運行方法"。
4多次數據采集
4.1按照步驟2編輯完整方法。
4.2點擊“序列"-“序列表"，輸入“樣品瓶"“樣品名稱"，“進樣次數"，選擇合適的“做樣方法"
4.3點擊“序列"-“序列參數"，選擇序列數據的保存路徑(序列會自動生成以“序列名稱-時間"為名稱的文件夾保存數據)，數據建議以選擇“前綴/計數器"保存。
4.4從“序列"菜單，選中“序列另存為?"，輸入一序列名，如“測試"，點擊“確定。
4.5從“運行控制"菜單中選擇“運行序列"。
5數據分析(脫機狀態(tài)使用)
5.1雙擊“儀器—脫機"圖標進入的脫機畫面。
5.2從“視圖"菜單中，點擊“數據分析"進入數據分析畫面。
5.3從“文件"菜單選擇“調用信號"，選中您的數據文件名。點擊“確定"，則數據被調出。(如預建立標準曲線，應先打開濃度較低的標樣圖譜。)
5.4做譜圖優(yōu)化：從“圖形"菜單中選擇“信號選項"。從“范圍"中選擇“滿量程"或“自動量程"及合適的時間范圍或選擇“自定義量程"調整。反復進行，直到圖的比例合適為止。點擊“確定"。
6積分：
6.1從“積分"菜單中選擇“積分事件"選項，選擇合適的“斜率靈敏度"，“峰寬"，“最小峰面積"，“最小峰高"。點擊，自動加載積分參數。
6.2點擊左邊“√"圖標，將積分參數存入方法并退出“積分事件"。
6.3如積分結果不理想，則修改相應的積分參數，直到滿意為止。
7標準曲線
7.1點擊“校正"-“校正設置"，輸入“含量單位"。
7.2點擊“校正"-“新建校正表"，點擊確定。輸入“化合物名稱"和“含量"，點擊“確定"，按照提示刪除其他組分。
7.3至此完成單級校正，如要增加校正級別，應從“文件"菜單選擇“調用信號"，選中您的數據文件名(第二個標樣)，點擊“校正"-“添加級別"，點擊確定，輸入“含量"，依次增加校正級別。
8打印報告
8.1從“報告"菜單中選擇“設定報告"選項，點擊“定量結果"框中“定量"右側的黑三角，選中“外標法"，其它選項不變，點擊“確定"。
8.2從“報告"菜單中選擇“打印報告"，則報告結果將打印到屏幕上，如想輸出到打印機上，則點擊“報告"底部的“打印"鈕。
8.3點擊“文件"-“另存為"-“方法"，把數據分析方法保存，下次分析可直接在“文件"-“調用"-“方法"下，將該方法調出使用。(調用的方法中含有積分方法，標準曲線方法和打印報告方法)
9關機
9.1關機前，先關紫外燈，用相應的溶劑(甲醇或乙腈)充分沖洗系統(tǒng)大約30分鐘。(色譜柱最終應保存在甲醇或乙腈中)
9.2退出化學工作站，依提示關泵，及其它窗口，關閉計算機。
9.3關閉Agilent1260各模塊電源開關。
10其它注意事項
10.1當樣品運行時，切勿打開自動進樣器前遮蓋，否則進樣過程停止。
10.2系統(tǒng)發(fā)生漏液時，機器會檢測到并停止進樣，狀態(tài)指示燈為紅色。檢查擦干并安置好漏液處，擦干漏液傳感器，單擊ON按鈕，系統(tǒng)重新初始化。
10.3注意紫外燈使用壽命，切勿來回開關紫外燈。
高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液，不受樣品揮發(fā)性的限制，流動相可選擇的范圍寬，固定相的種類繁多，因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質。與試樣預處理技術相配合，HPLC所達到的高分辨率和高靈敏度，使分離和同時測定性質上十分相近的物質成為可能，能夠分離復雜相體中的微量成分。隨著固定相的發(fā)展，有可能在充分保持生化物質活性的條件下完成其分離HPLC成為解決生化分析問題最有前途的方法。由于HPLC具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復利用，流出組分易收集等優(yōu)點，因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析、無機分析等各種領域。
