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第八屆圖書館論壇 校體購(gòu)2

粗多糖含量測(cè)定中標(biāo)準(zhǔn)品的選擇

教育裝備采購(gòu)網(wǎng) 2016-07-13 09:02 圍觀718次

  多糖是存在于自然界的醛糖和(或)酮糖通過(guò)糖苷鍵連接在一起的聚合物(一般10個(gè)以上)。多糖是一切有生命的有機(jī)體必不可少的成分,它與維持生命的種種生理機(jī)能有著密切的聯(lián)系。用于粗多糖含量測(cè)定的方法有很多,一類是利用了多糖的還原性,測(cè)定還原性多糖的方法有3, 5-二硝基水楊酸鹽(DNS)比色法和Somogyi-Nelson法。另一類測(cè)定方法,也是現(xiàn)在普遍使用的方法,是利用多糖在強(qiáng)酸性條件下脫水生成糠醛或其衍生物,然后再與酚類或胺類化合物縮合,生成有特殊顏色的物質(zhì)的這一性質(zhì)進(jìn)行測(cè)定,這類方法有地衣酚-硫酸法、苯酚-硫酸法和蒽酮-硫酸法。

  苯酚-硫酸法是用得較多的方法,苯酚-硫酸試劑可與游離的寡糖、多糖中的己糖、糖醛酸起顯色反應(yīng),己糖在490 nm處有最大吸收值,吸收值與糖含量呈線性關(guān)系。此法是先用標(biāo)準(zhǔn)糖制作標(biāo)準(zhǔn)曲線后,再通過(guò)多糖的顯色反應(yīng)測(cè)定吸光度,然后根據(jù)其在曲線上的位置推算出多糖的濃度從而推算其含量。此法操作簡(jiǎn)單、快速、靈敏、重復(fù)性好,對(duì)每種糖僅需制作一條標(biāo)準(zhǔn)曲線。蒽酮-硫酸法是另一種常用的方法,其原理是利用糖類遇濃硫酸脫水后生成糖醛或其衍生物,可與蒽酮試劑縮合,反應(yīng)后溶液呈藍(lán)綠色,于620 nm處有最大吸收,顯色深度與多糖的含量呈線性關(guān)系。

  品名:葡聚糖 Dextran

  CAS NO: 9004-54-0

  分子式:C6nH10nO5n

品牌

產(chǎn)品名稱型號(hào)

貨 號(hào)

包裝規(guī)格

市場(chǎng)價(jià)

折扣價(jià)

Pefermiker

葡聚糖5, Dextran,分子量5000

C16-D104010-25g

25g

348.00

278.00

Pefermiker

葡聚糖5, Dextran,分子量5000

C16-D104010-100g

100g

1596.00

1276.00

Pefermiker

葡聚糖5, Dextran,分子量5000

C16-D104010-500g

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葡聚糖40,Dextran,分子量40000

C16-D104008-25g

25g

142.40

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Pefermiker

葡聚糖40,Dextran,分子量40000

C16-D104008-100g

100g

309.00

247.00

Pefermiker

葡聚糖40,Dextran,分子量40000

C16-D104008-500g

500g

1268.00

1014.00

  目前,在制作標(biāo)準(zhǔn)曲線的標(biāo)準(zhǔn)品的選用上普遍存在爭(zhēng)議。葡萄糖因?yàn)槠涞土膬r(jià)格和方便的來(lái)源,一直是研究人員的首選。但當(dāng)我們深究比色法的原理,發(fā)現(xiàn)其本身不能區(qū)分單糖和寡糖,所以它的測(cè)定結(jié)果很大程度上依賴于標(biāo)準(zhǔn)品的選擇。此外,比色法通常用濃硫酸短時(shí)間水解粗多糖,對(duì)于分子量較小的粗多糖,高濃度的硫酸可以在較短時(shí)間內(nèi)將其水解成寡糖和單糖,但當(dāng)粗多糖的分子量較大時(shí),水解是很難控制的。比如對(duì)香菇粗多糖(分子量500,000~1,000,000)的完全水解就需要4M HCl或2M H2SO4于100℃作用3-6小時(shí)。因此如果用葡萄糖做標(biāo)準(zhǔn)曲線,勢(shì)必對(duì)粗多糖樣品中大分子部分的測(cè)量帶來(lái)很大的誤差。所以,國(guó)內(nèi)外的學(xué)者的研究數(shù)據(jù)表明:1)對(duì)于比色法測(cè)定當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)品與被測(cè)樣品的結(jié)構(gòu)類似時(shí),得到的結(jié)果要準(zhǔn)確得多[1];2)用葡萄糖做標(biāo)準(zhǔn)品和用葡聚糖做標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)粗多糖含量時(shí),前者測(cè)的結(jié)果不同程度的偏高[2, 3]。這樣看來(lái),用葡萄糖作為測(cè)定多糖含量的標(biāo)準(zhǔn)品是不合適的。

  燕麥β-葡聚糖是一種β-(1→3)-(1→4)鍵接的線性葡聚糖,在結(jié)構(gòu)、粘度等其他物理性質(zhì)上與常見(jiàn)的植物和真菌多糖很相似,適合作為植物、真菌來(lái)源多糖含量測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)品。但由于多糖純化困難,市面上不少葡聚糖純度較低,不適合作為標(biāo)準(zhǔn)品。

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