DNA提取主要是CTAB方法，其他的方法還有物理方式如玻璃珠法、超聲波法、研磨法、凍融法?；瘜W方式如異硫氰酸胍法、堿裂解法。生物方式:酶法。根據(jù)核酸分離純化方式的不同有;硅質(zhì)材料、陰離子交換樹脂等。

　　方法(一)

　　試劑：

　　1. 抽提緩沖液、2% CTAB (W/V)、2% PVP K25 (w/v) (去色素)、100mM Tris-HCl (pH8.0)、25mM EDTA、(pH8.0)、2.0M NaCl。上海創(chuàng)賽提供乙二胺四乙酸(EDTA)標液，60-00-4，商品編號：D16-1014183-濃度：0.1N/L，價格288元。

　　2.10M LiCl

　　3. 2M LiCl

　　4.DEPC-water(抑制RNA酶活性)

　　5. 3M NaAc (pH5.2)

　　6. 96% 乙醇

　　7. 70% 乙醇

　　步驟：

　　1.抽提緩沖液65℃預熱;

　　2. 加菌體到已經(jīng)預熱的緩沖液(700ul)中混勻，65℃，10min;

　　3. 加酚/氯仿/異戊醇(25：24：1)，振蕩，離心12,000rpm，10min;

　　4.取上清，加氯仿/異戊醇(24：1)振蕩，離心12,000rpm，10min;

　　5. 取上清，重復4步驟;

　　6. 加入1/10體積的3M醋酸鈉和1.5倍體積的乙醇(或加入等體積的異丙醇)，-20C沉淀;

　　11. 離心12,000rpm，10min;

　　12. 棄上清，70%乙醇洗，也可以再用100%乙醇洗，然后溶解于100ml 水中。

　　方法(二)

　　1. 將菌株接種于液體LB培養(yǎng)基，37℃震蕩培養(yǎng)過夜。

　　2. 取1.5ml培養(yǎng)物12000rpm離心2min。

　　3. 沉淀物加入567 ul的TE緩沖液，反復吹打使之重新懸浮，加入30ul 10%SDS和15ul的蛋白酶K，混勻，于37℃溫育1h。上海創(chuàng)賽提供十二烷基硫酸鈉(SDS)，AR，92.5-100.5%，151-21-3，商品編號：C16-S10436-500g，價格50元。

　　4. 加入100ul 5mol/L NaCl, 充分混勻，再加入80ul CTAB/NaCl溶液，混勻后再65℃溫育10min。

　　5. 加入等體積的酚/氯仿/異戊醇混勻，離心4-5min, 將上清轉(zhuǎn)入一只新管中，加入0.6-0.8倍體積的異丙醇，輕輕混合直到DNA沉淀下來，沉淀可稍加離心。上海創(chuàng)賽提供異丙醇,99.5%,超干,含分子篩,水≤50ppm,67-63-0，商品編號：C52-H11026-100ml，價格150元。

　　6. 沉淀用1ml的70%乙醇洗滌后，離心棄乙醇。

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