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第八屆圖書館論壇 校體購2

單克隆與多克隆抗體的區(qū)別

教育裝備采購網(wǎng) 2016-08-29 09:53 圍觀864次
抗體的產(chǎn)生
把某一抗原免疫某種動物而得到單抗或多抗。如果用經(jīng)免疫過的動物的脾細胞獲得雜交瘤細胞,則得到單克隆抗體,如果用動物的血清,則得到多克隆抗體。但從理論上說,這些抗體都應針對抗原來自的動物,例如如果用人蛋白抗原免疫小鼠,則這些抗體為鼠抗人。由于一個大蛋白分子表面具有多種抗原決定簇,因此,免疫動物后,這些不同的決定簇分別誘導動物產(chǎn)生不同的抗體,每種抗體的特異性不同。上海創(chuàng)賽科技提供BD抗體550041,PE Mouse Anti-Human CD30,商品編號:BD-550041-20 µl,詢價。
單抗是有單個細胞起源的細胞克隆分泌的,所以只針對蛋白抗原的單一抗原決定簇,而多抗是有多個不同克隆的B細胞產(chǎn)生的,是多種細胞的混合物,但其中的每一種抗體也只是針對一種決定簇。多抗混合物中的每一抗體與蛋白抗原結(jié)合的能力是不同的,因此用多抗做實驗與用單抗可有其優(yōu)勢,那就是能確??贵w與抗原結(jié)合從而顯示抗原信息。但也有其缺點,那就是交叉反應,往往造成假陽性。從理論上說,用人抗原誘導產(chǎn)生的抗體應只能用于人類,但由于動物種屬之間,特別是相近的動物之間,如人與猩猩,大鼠與小鼠存在著同源性,導致抗體的交叉反應,即用一種動物抗原誘導產(chǎn)生的抗體也可與其它一些動物的抗原反應。
由于單抗只針對單一抗原決定簇,因此,其能導致的交叉反應很少,而多抗是混合物,導致的交叉反應就多一些。但并不是向你所認為的那樣,多抗可與所有種屬動物反應。在選擇抗體時,如果你標本來源于人,當然應選用如鼠抗人或兔抗人等。如果抗體來源確實不清,那應該先預實驗。選擇已知陽性標本,在充分設置陰性對照的前提下,用此抗體染色,看能否顯示陽性結(jié)果。
抗原的區(qū)別
可以引起機體產(chǎn)生抗體的分子結(jié)構叫做抗原決定簇,也稱為抗原表位。一個抗原可以有許多不同的抗原決定簇,因此,機體也可以產(chǎn)生多種不同的抗體。由單一B細胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅識別某一特定抗原表位的抗體,稱為單克隆抗體。而由多個B淋巴細胞克隆產(chǎn)生的,受到多種抗原決定簇刺激并可以與多種抗原表位結(jié)合的抗體就是多克隆抗體。
制備的區(qū)別
經(jīng)過特定抗原處理過的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞通過細胞融合的方法得到雜交瘤細胞,經(jīng)HAT培養(yǎng)基篩選、ELISA檢測效價后就得到陽性克隆株,最后進行細胞培養(yǎng)或?qū)⒓毎⑷氲絼游铮ㄒ话銥閎alb/c小鼠)腹腔中用腹水培養(yǎng),收集上清/腹水純化后就能得到單克隆抗體。而制備多克隆抗體就沒有單克隆抗體繁瑣,只需將抗原(純度越高越好)直接注入到動物體內(nèi)進行免疫,經(jīng)過3~4次免疫,ELISA測其效價合格后,收集血液離心得到上清,純化后即能得到多克隆抗體。因此多抗制備的周期就比單抗制備的短,首次制備價格也比單抗要低。
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