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DNA轉(zhuǎn)染和轉(zhuǎn)化技術(shù)的區(qū)別

教育裝備采購(gòu)網(wǎng) 2016-08-31 10:08 圍觀436次

  轉(zhuǎn)染和轉(zhuǎn)化是與基因(主要是DNA)轉(zhuǎn)移相關(guān)的兩種技術(shù),廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)領(lǐng)域。

  轉(zhuǎn)染

  轉(zhuǎn)染的定義是“將具生物功能的核酸轉(zhuǎn)移或運(yùn)送到細(xì)胞內(nèi)并使核酸在細(xì)胞內(nèi)維持其生物功能”。其中,核酸包括DNA (質(zhì)粒和線性雙鏈DNA ),反義寡核苷酸及RNAi(RNA interference)?;蜣D(zhuǎn)染技術(shù)已廣泛應(yīng)用于基因組功能研究(基因表達(dá)調(diào)控,基因功能,信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和藥物篩選研究)和基因治療研究。上海創(chuàng)賽科技提供核糖核酸酶A,BR,9001-99-4,商品編號(hào):D16-1027286-25mg,價(jià)格138元。

  基因轉(zhuǎn)染需要一定的轉(zhuǎn)染試劑將帶有目的基因的載體運(yùn)送到細(xì)胞內(nèi)。早期的磷酸鈣轉(zhuǎn)染法轉(zhuǎn)染效率很低,且對(duì)很多細(xì)胞株無(wú)效,因此不能滿足很多科研工作的需要。目前,最常用的轉(zhuǎn)染試劑是陽(yáng)離子脂質(zhì)體和陽(yáng)離子聚合物,它們?cè)诳朔?xì)胞屏障方面跟病毒有很相象的特征,容易透過(guò)細(xì)胞膜。其中,陽(yáng)離子脂質(zhì)體在體外基因轉(zhuǎn)染中有很高的效率,然而在體內(nèi),它迅速被血清清除,在肺組織內(nèi)累積,誘發(fā)強(qiáng)烈的抗炎反應(yīng),這將導(dǎo)致高水平的毒性,因此,在很大程度上限制了其應(yīng)用。由于陽(yáng)離子脂質(zhì)體的局限性,陽(yáng)離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑日益受到重視。上海創(chuàng)賽科技提供水合甘油磷酸鈣,95%,27214-00-2,商品編號(hào):D16-1040717-25g,價(jià)格408.25元。

  轉(zhuǎn)化

  轉(zhuǎn)化特指將質(zhì)粒DNA 或以其為載體構(gòu)建的重組DNA 導(dǎo)入細(xì)菌體內(nèi),使之獲得新的遺傳特性的一種方法。它是微生物遺傳、分子遺傳、基因工程等研究領(lǐng)域的基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)之一。受體細(xì)胞經(jīng)過(guò)一些特殊方法(如:電擊法,CaCl2等化學(xué)試劑法)處理后,使細(xì)胞膜的通透性發(fā)生變化,成為能容許外源DNA 分子通過(guò)的感受態(tài)細(xì)胞。進(jìn)入細(xì)胞的DNA 分子通過(guò)復(fù)制、表達(dá)實(shí)現(xiàn)遺傳信息的轉(zhuǎn)移,使受體細(xì)胞出現(xiàn)新的遺傳性狀。上海創(chuàng)賽科技提供無(wú)水氯化鈣(>96%,Tech Grade),10043-52-4,商品編號(hào):C84-0713-500g,價(jià)格49.4元。

  由外來(lái)DNA 引起生物體遺傳性狀改變的過(guò)程稱為轉(zhuǎn)化(transformation)。噬菌體常??筛腥炯?xì)菌并將其DNA 注入細(xì)菌體內(nèi),也可引起細(xì)菌遺傳性狀的改變。通過(guò)感染方式將外來(lái)DNA 引入宿主細(xì)胞,并導(dǎo)致宿主細(xì)胞遺傳性狀改變的過(guò)程稱為轉(zhuǎn)染(transfection)。轉(zhuǎn)染是轉(zhuǎn)化的一種特殊形式。上海創(chuàng)賽科技提供重組大鼠CD226/DNAM-1蛋白(Fc標(biāo)簽),商品編號(hào):C86-803-69-50ug,價(jià)格2210元。

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