SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)操作步驟

　　1.按圖安裝玻璃板

　　2.按表制備分離膠(10%)，將分離膠混勻后立即灌注于玻板間隙中，上層小心覆蓋一層乙醇，將膠板垂直放于室溫下，待分離膠聚合完全后，傾去上鋪乙醇，用濾紙吸干。

　　3.制備濃縮膠(4%)：將濃縮膠混合后直接灌注在已聚合的分離膠上，立即插入梳子，將凝膠垂直放于室溫下聚合。

　　4.樣品處理：在濃縮膠聚合時，取樣品與等體積樣品緩沖液混合，100℃加熱1-2min。

　　5.待濃縮膠聚合完全后，小心移出梳子，然后將膠板固定于電泳裝置上，上下槽各加入電泳緩沖液。

　　6.加樣：用微量進(jìn)樣器加樣，每個樣品加入20μl。

　　7.電泳：在100-150V恒壓下電泳，直至溴酚藍(lán)達(dá)到膠底部，關(guān)閉電源。

　　8.染色：從電泳裝置上卸下玻板，小心橇開玻板取出凝膠，放入染色液中染色2h以上。

　　9.脫色：移出凝膠放入脫色液中脫色至本底無色為止。

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