三氯蔗糖又名三氯半乳蔗糖，俗稱(chēng)蔗糖素，由英國(guó)泰萊公司(Tate&Lyie)與倫敦大學(xué)共同研制并于1976年申請(qǐng)專(zhuān)利的一種新型甜味劑。由于其具有甜度高(甜度為蔗糖的600倍)、甜味純正等特點(diǎn)，被認(rèn)為是目前最優(yōu)秀的功能性甜味劑之一，代表了目前強(qiáng)力甜味劑研究的最高水平。雖然科學(xué)家們經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期的毒理實(shí)驗(yàn)證明其具有較高的安全性，但也有三氯蔗糖可誘發(fā)偏頭疼發(fā)作的報(bào)道。
建立食品中三氯蔗糖的測(cè)定方法，可為食品生產(chǎn)企業(yè)提供生產(chǎn)性指導(dǎo)，并為質(zhì)量監(jiān)督部門(mén)提供食品質(zhì)量監(jiān)管依據(jù)。我國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《GB 22255-2014 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中三氯蔗糖（蔗糖素）的測(cè)定》中制定了三氯蔗糖的HPLC-ELSD檢測(cè)方法。
方法優(yōu)勢(shì)：
迪馬科技在參考國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《GB 22255-2014 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中三氯蔗糖（蔗糖素）的測(cè)定》基礎(chǔ)上，進(jìn)行了方法優(yōu)化，推出《食品中三氯蔗糖的測(cè)定》方法，該方法：
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采用固相萃取-高效液相色譜法測(cè)定食品中的三氯蔗糖，使用ProElut PLS 固相萃取柱凈化樣品，通過(guò)HPLC-ELSD檢測(cè)；
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前處理步驟簡(jiǎn)單、凈化效果好、重現(xiàn)性好，定量限7.5 mg/kg，符合《GB 22255-2014 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中三氯蔗糖（蔗糖素）的測(cè)定》對(duì)三氯蔗糖的限量規(guī)定；
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適用于各省市出入境、質(zhì)檢、疾控、食品藥品檢驗(yàn)所、第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)、食品檢測(cè)機(jī)構(gòu)、大型食品生產(chǎn)商、高校和科研院所等。
以下為詳細(xì)解決方案，敬請(qǐng)參考！
食品中三氯蔗糖的測(cè)定——HPLC法
1、適用范圍
本方案適用于液態(tài)奶、酸奶、醬油、醋、餅干、奶酪、奶茶、可樂(lè)和果凍中三氯蔗糖的檢測(cè)，方法定量限7.5 mg/kg。
2、標(biāo)準(zhǔn)品配制
標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：準(zhǔn)確稱(chēng)取標(biāo)準(zhǔn)品，用水配制成10 mg/mL的儲(chǔ)備液，吸取一定體積10 mg/mL儲(chǔ)備液用水配成濃度為1000 μg/mL的儲(chǔ)備液。
3、提取
3.1 含蛋白脂肪類(lèi)液體：液態(tài)奶、酸奶、醬油和醋
10 mL樣品，加入8 mL 水和2 mL 200 g/L乙酸鉛溶液，振蕩2 min，超聲提取5 min，6000 rpm離心5 min，取10 mL上清液，待凈化；
3.2 含蛋白脂肪類(lèi)固體：餅干、奶酪和奶茶
5 g樣品，加入8 mL 水和2 mL 200 g/L乙酸鉛溶液，振蕩2 min，超聲提取5 min，6000 rpm離心5 min，取10 mL上清液，待凈化；
3.3 飲料：可樂(lè)（量取前超聲排氣泡）
10 mL樣品，加入10 mL 水，混勻，取10 mL，待凈化；
3.4 果凍
5 g樣品，加入5 mL 水，熱水超聲溶解，混勻，趁熱凈化。
注：《GB 22255-2014 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中三氯蔗糖（蔗糖素）的測(cè)定》中提取液為75%甲醇水溶液，減壓濃縮過(guò)程中暴沸嚴(yán)重，不易操作。
4、凈化——ProElut 200 mg/6 mL PLS（Cat.#：68012）
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(1)活 化： |
依次向柱中加入5 mL甲醇、5 mL水，棄去流出液； |
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(2)上 樣： |
將待凈化液加入柱中，棄去流出液（控制流速不超過(guò)每秒1滴）； |
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(3)淋 洗： (4)洗 脫： |
向柱中加入5 mL 20%甲醇水溶液，棄去流出液； 向柱中加入3 mL甲醇，收集流出液； |
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(5)定 容： |
將洗脫液在50 ℃下減壓蒸干，用流動(dòng)相定容至1 mL，供HPLC分析。 |
5、色譜條件
色譜柱：Diamonsil C18(2) 150 × 4.6 mm，5 μm（Cat.#：99601）
流速：1.0 mL/min
進(jìn)樣量：20 μL
柱溫：35 ℃
檢測(cè)器：SEDEX LT-ELSD，溫度：40℃，壓力：3.5 bar，Gain：6
流動(dòng)相：A：水；B：乙腈
梯度設(shè)置
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時(shí)間/Min. |
0 |
14 |
15 |
22 |
23 |
30 |
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A（%） |
89 |
89 |
10 |
10 |
89 |
89 |
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B（%） |
11 |
11 |
90 |
90 |
11 |
11 |
6、添加回收結(jié)果
食品中三氯蔗糖的HPLC檢測(cè)的添加回收結(jié)果
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添加水平200 mg/kg |
添加水平20 mg/kg |
添加水平7.5 mg/kg |
空白含量(μg/mL) |
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回收率(%) |
加標(biāo)量 |
回收率(%) |
加標(biāo)量 |
回收率(%) |
加標(biāo)量 |
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早餐奶 |
99.01 |
10 mg/mL 200 μL |
109.82 |
1000 μg/mL 200 μL |
96.52 |
1000 μg/mL 75 μL |
— |
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巧克力奶 |
99.70 |
10 mg/mL 200 μL |
100.91 |
1000 μg/mL 200 μL |
95.88 |
1000 μg/mL 75 μL |
— |
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咖啡奶 |
100.34 |
10 mg/mL 200 μL |
112.34 |
1000 μg/mL 200 μL |
126.00 |
1000 μg/mL 75 μL |
— |
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養(yǎng)樂(lè)多 |
128.83 |
10 mg/mL 200 μL |
— |
— |
— |
— |
130.8 |
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酸奶 |
— |
— |
105.58 |
1000 μg/mL 200 μL |
123.42 |
1000 μg/mL 75 μL |
— |
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醬油 |
77.85 |
10 mg/mL 200 μL |
— |
— |
— |
— |
113.48 |
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醋 |
108.22 |
10 mg/mL 200 μL |
143.64 |
1000 μg/mL 200 μL |
205.47 |
1000 μg/mL 75 μL |
— |
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餅干 |
— |
— |
102.64 |
1000 μg/mL 100 μL |
103.28 |
1000 μg/mL 37.5 μL |
— |
|
奶酪 |
— |
— |
88.04 |
1000 μg/mL 100 μL |
82.78 |
1000 μg/mL 37.5 μL |
— |
|
奶茶 |
— |
— |
101.48 |
1000 μg/mL 100 μL |
169.05 |
1000 μg/mL 37.5 μL |
— |
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可樂(lè) |
— |
— |
103.97 |
1000 μg/mL 200 μL |
98.49 |
1000 μg/mL 75 μL |
— |
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果凍 |
— |
— |
93.89 |
1000 μg/mL 100 μL |
96.27 |
1000 μg/mL 37.5 μL |
— |
食品中三氯蔗糖的測(cè)定——HPLC法相關(guān)產(chǎn)品信息：
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貨號(hào) |
名稱(chēng) |
規(guī)格 |
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樣品前處理 |
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68012 |
ProElut PLS |
200 mg/6 mL, 30/pk |
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244358 |
12管防交叉污染真空SPE萃取裝置 |
12位 |
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4803 |
1,3,6mL柱管通用連接器 |
15/pk |
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4806 |
考克(控制流量) |
15/pk |
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99011 |
真空/正壓兩用泵，無(wú)油 |
1/pk |
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99013 |
抽濾瓶套裝 (包括硅橡膠管2米,2L抽濾瓶及橡膠塞) |
1/pk |
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30039 |
FitMax針頭式過(guò)濾器 Nylon |
13 mm,0.22 μm 100/pk |
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30040 |
FitMax針頭式過(guò)濾器 Nylon |
13 mm,0.45 μm 100/pk |
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標(biāo)準(zhǔn)品 |
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53-69293-100G |
三氯蔗糖[56038-13-2] |
100 g |
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色譜柱及保護(hù)柱 |
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99601 |
Diamonsil C18(2) |
150 × 4.6 mm，5 μm |
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HPLC溶劑?緩沖鹽?離子對(duì)試劑 |
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50101 |
乙腈 HPLC級(jí) |
4 L |
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50102 |
甲醇 HPLC級(jí) |
4 L |
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通用色譜產(chǎn)品 |
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52401B |
瓶架/藍(lán)色（現(xiàn)貨） |
50孔 |
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52401A |
瓶架/白色（現(xiàn)貨） |
50孔 |
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1034 |
樣品瓶（棕色/螺紋） |
2 mL, 100/pk |
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1035 |
樣品瓶蓋/含墊（已經(jīng)組裝） |
100/pk |
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H80465 |
HPLC 進(jìn)樣針 |
25 μL |
紅色產(chǎn)品貨號(hào)#30039、#30040、#1034、#1035火熱促銷(xiāo)中
