首先在定氮儀蒸氣發(fā)生器中加約2/3體積蒸餾水，加入數(shù)滴硫酸使其保持酸性，以避免水中的氨被蒸出而影響結(jié)果，并放入少許沸石(或毛細(xì)管等)，以防爆沸。這個(gè)步驟有點(diǎn)類似于凱氏定氮法的消化前步驟，用相應(yīng)的試劑對其進(jìn)行清洗。沿小玻杯壁加入蒸餾水約20mL讓水經(jīng)插管流入反應(yīng)室，但玻杯內(nèi)的水不要放光，塞上棒狀玻塞，保持水封，防止漏氣。這一步可直接驗(yàn)證插管是否可以使用。
蒸氣發(fā)生后，立即關(guān)閉廢液排放管上的開關(guān)，使蒸氣只能進(jìn)入反應(yīng)室，導(dǎo)致反應(yīng)室內(nèi)的水迅速沸騰，蒸出蒸氣由反應(yīng)室上端口通過定氮球進(jìn)入冷凝管冷卻，在冷凝管下端放置一個(gè)錐形瓶接收冷凝水。從定氮球發(fā)燙開始計(jì)時(shí)，連續(xù)蒸煮5min，然后移開煤氣燈。沖洗完畢，夾緊蒸氣發(fā)生器與收集器之間的連接橡膠管，由于氣體冷卻壓力降低，反應(yīng)室內(nèi)廢液自動抽到反應(yīng)室外殼中，打開廢液排出口夾子放出廢液。整個(gè)清洗過程，到這里就結(jié)束了，經(jīng)過清洗這個(gè)過程，定氮儀內(nèi)部環(huán)境已經(jīng)符合我們測定蛋白質(zhì)含量的需求，另外，定氮儀的各部件也得到了檢驗(yàn)，可以及時(shí)更換漏氣或者其他壞了的部分。根據(jù)以上步驟重復(fù)清洗2～3次，再在冷凝管下?lián)Q放一個(gè)盛有硼酸-指示劑混合液的錐形瓶使冷凝管下口完全浸沒在溶液中，蒸餾1～2min，觀察錐形瓶內(nèi)的溶液是否變色。如不變色，表示蒸餾裝置內(nèi)部已洗干凈。
定氮儀蒸主要特征：
1.定氮蒸餾器工作用水采用自來水和蒸餾水均可。
2.儀器采用一鍵式操作，只要按下工作鍵，儀器將按照設(shè)定的量自動進(jìn)行加水、加堿和蒸餾。
3.樣品蒸餾完成后有聲音報(bào)警。
4.定氮蒸餾器采用了高性能進(jìn)口堿泵，大大延長了堿泵的使用壽命。
5.設(shè)置了專門的清洗鍵，可對堿回路進(jìn)行清洗，避免堿結(jié)晶的產(chǎn)生。
