魚肉中妥布霉素的測定——SPE-UPLC-MS/MS法解決方案

　　參考標(biāo)準(zhǔn)《GB/T 21323-2007 動(dòng)物組織中氨基糖苷類藥物殘留量的測定 高效液相色譜-質(zhì)譜質(zhì)譜法》

　　目前有關(guān)妥布霉素檢測的文獻(xiàn)和標(biāo)準(zhǔn)較少，主要參考標(biāo)準(zhǔn)《GB/T 21323-2007 動(dòng)物組織中氨基糖苷類藥物殘留量的測定 高效液相色譜-質(zhì)譜質(zhì)譜法》;高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(HPLC-MS/MS)具有高靈敏度和高特異性，適用于基質(zhì)復(fù)雜、樣品組分含量很低的獸藥殘留的確證分析。

　　方法優(yōu)勢

　　迪馬科技開發(fā)的《魚肉中妥布霉素的檢測》：

　　(1) 采用三氯乙酸水提取、ProElut PXC固相萃取柱凈化和超高效液相色譜-質(zhì)譜法檢測;

　　(2) 具有前處理步驟簡單、回收率高、方法穩(wěn)定性好、凈化效果優(yōu)異等特點(diǎn);

　　(3) 使用氰基液相色譜柱進(jìn)行分析，峰形和保留時(shí)間均符合要求;

　　(4) 過柱方法簡單易操作，對(duì)操作人員要求不高，檢測成本相對(duì)較低;

　　(5) 定量限是20 μg/kg，與國標(biāo)方法一致。

　　魚肉中妥布霉素的測定——SPE-UPLC-MS/MS法

　　1、適用范圍

　　本方案適用于魚肉中妥布霉素檢測。本方法定量限是20.0 μg/kg。

　　2、 標(biāo)準(zhǔn)品配制

　　(1) 單標(biāo)儲(chǔ)備液1000 μg/mL，準(zhǔn)確稱取妥布霉素，用水配制成1000 μg/mL的儲(chǔ)備液。

　　(2) 中間液10.0 μg/mL，吸取適量單標(biāo)儲(chǔ)備液1000 μg/mL，用水配制成10 μg/mL的中間液。

　　3、提取

　　(1) 稱取樣品(魚肉)5.0 g(精確至0.05 g)，置于50mL離心管中。加入20 mL三氯乙酸水(25 g/L)和2 mL二氯甲烷，渦旋分散，振蕩5 min，8000 r/min離心2min，收集上清液;

　　(2) 在上清液中加入5 mL乙腈混勻，8000 r/min離心2 min，待凈化(離心為了去除乙腈水溶解時(shí)產(chǎn)生的氣泡)。

　　4、凈化—— ProElut PXC 60 mg/3 mL(Cat.# 68203)

　　(1)活化：

　　依次加入3 mL甲醇，3 mL水，流出液棄去;

　　(2)上樣：

　　將上樣液加入柱中，流出液棄去;

　　(3)淋洗：

　　(4)洗脫：

　　依次用5 mL水、3 mL甲醇淋洗，流出液棄去;

　　3 mL 20%氨水甲醇洗脫，收集洗脫液;

　　(5)定容：

　　將洗脫液在40 ℃水浴下通入氮?dú)獯抵?.2 mL，然后用流動(dòng)相重新定容至0.5 mL，上機(jī)分析。

　　同方法制備基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液。

　　5、色譜條件

　　UPLC 條件：

　　色譜柱：Platisil CN，150 x 4.6 mm，5 μm (Cat.# 99506)

　　流 速：0.5 mL/min

　　進(jìn)樣量：5 μL

　　柱 溫：35 ℃

　　流動(dòng)相： A：3%甲酸水 B：3%甲酸乙腈 A：B=9:1

質(zhì)譜條件：

定性離子對(duì)、定量離子對(duì)、碰撞氣能量及去簇電壓見下表

6、添加回收結(jié)果

魚肉中妥布霉素檢測的添加回收結(jié)果(%)

妥布霉素標(biāo)準(zhǔn)品0.2 μg/mL的MRM色譜圖

魚肉中妥布霉素的測定——SPE-UPLC-MS/MS法相關(guān)產(chǎn)品信息

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