植物葉片(綠色部位)光合速率的測定

　　實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備：

　　儀器：氧電極系統(tǒng)一套;30ml針筒，剪刀，雙面刀(或單面刀)，1ml移液器，鑷子，吸管，吸水紙，打孔器。

　　試劑：(1)測定介質(zhì)50mmol/L pH7.5的Tris-HCl緩沖溶液，內(nèi)含50mmol/L的HCO3-。稱取6.05克Tris(三羥甲基氨基甲烷)、2.1克NaHCO3溶于800～900ml水中，滴加1mol/L HCl，調(diào)pH7.5，加水1000ml。除此之外，測定介質(zhì)還可用磷酸、Hepes、Tricine等pH7.5 50mmol/L的緩沖液。僅用pH7.5的50mmol/L NaHCO3的水溶液也可作測定介質(zhì)。

　　(2)0.5mol/L KCl：稱取1.86克KCl溶于50ml蒸餾水中(配好后可長時(shí)間使用)。實(shí)驗(yàn)步驟：

　　1準(zhǔn)備好所需的儀器和試劑，安裝好氧電極，并與計(jì)算機(jī)連接，校正(詳細(xì)操作步驟見廠家提供的說明書或漢語說明書)。

　　2材料準(zhǔn)備：取光適應(yīng)好的小麥、水稻等植物葉片(組織)，用打孔器取一定面積(稱取一定重量)(按每ml反應(yīng)體積需0.5cm2葉碎片取樣)，將葉塊放入盛有測定介質(zhì)的小燒杯中，然后將小燒杯放到真空器中進(jìn)行抽氣，排出葉片(組織)細(xì)胞間隙內(nèi)的氣體，使葉片沉到底部?；蛘邔⑷~碎塊倒入30ml注射器中，進(jìn)行手工真空滲入，排除葉內(nèi)氣體，使葉塊下沉。然后將下沉的葉塊取出，用剪刀剪成面積約為2mm2的碎片，放入氧電極反應(yīng)杯中。

　　3光合速率的測定:準(zhǔn)確加入50mmol/L NaHCO3溶液1～1.5ml。打開光源，給反應(yīng)杯照光。因“光合滯后期”緣故，葉片在照光初期仍處于耗氧狀態(tài)，需過1～3分鐘后才由耗氧轉(zhuǎn)為放氧，所以應(yīng)在照光下適應(yīng)一段時(shí)間后，再進(jìn)行光合速率的測定。

　　4反應(yīng)結(jié)束后，將反應(yīng)杯清洗，重復(fù)步驟3，所有實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，存儲(chǔ)數(shù)據(jù)。按說明書操作，清洗反應(yīng)杯，清潔電極，保持電極的干燥。(注意事項(xiàng)見說明書)

　　5光合速率的計(jì)算:從記錄曲線得到單位時(shí)間氧的變化量，根據(jù)葉片面積和反應(yīng)介質(zhì)的體積計(jì)算出樣品的光合速率。

　　完成該實(shí)驗(yàn)可以選用的氧電極型號(hào)有：Leaflab2(只能用于測定葉片)、Chlorolab2、Chlorolab3。