B0D5基本原理：
定義;生化需氧量（BOD5）定義為水中需氧微生物消耗溶解氧的量，當(dāng)樣品放在培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)溫度為20℃培養(yǎng)五天時(shí)，測(cè)定所消耗溶解氧的含量來(lái)確定水樣的BOD5值
生化需氧量（英文縮寫(xiě)B(tài)OD），是在特定條件下，通過(guò)水中需氧微生物的繁殖和呼吸作用，分解水中有機(jī)物質(zhì)時(shí)所消耗或所需要溶解氧量。水中的BOD5值通常以樣品在20℃放置5天所消耗溶解氧的量(mg/L數(shù))表示，記為“BOD5”。
2、測(cè)定原理：
將預(yù)選好量程并按量程范圍量好體積的水樣倒入培養(yǎng)瓶中，在主機(jī)攪拌器上連續(xù)攪拌。并將主機(jī)和培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中。調(diào)節(jié)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度為20℃±1℃，待樣品恒溫后行五日培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶中的水樣在連續(xù)攪拌的情況下保證了足夠的溶解氧供微生物行生化反應(yīng)。水樣中的有機(jī)物經(jīng)過(guò)生物氧化作用，轉(zhuǎn)變成氮、碳和硫的氧化物。在這過(guò)程中，從水樣中溢出的氣體二氧化碳被氫氧化鈉(或氫氧化鉀)吸收。此時(shí)，培養(yǎng)瓶中空氣壓力減少量，相當(dāng)于微生物所消耗的溶解氧含量，即水樣BOD5值與瓶中空氣壓力減少的程度成正比，所以BOD5的值可以由空氣壓力減少值來(lái)測(cè)定，增加或減少所取樣品的量可以增加或降低壓力減少值。這樣操作者就能準(zhǔn)確測(cè)量很寬范圍的BOD5值。培養(yǎng)瓶中空氣壓力的變化是通過(guò)壓力計(jì)中汞柱度的變化來(lái)行檢測(cè)的，通過(guò)簡(jiǎn)單的計(jì)算即能讀出水樣的BOD5值。
影響B(tài)OD5測(cè)定的因素
—溶解氧：
冬季所取的樣品由于試驗(yàn)溫度設(shè)在20℃，使得溶解氧過(guò)飽和，夏季所取的樣品在20℃時(shí)溶解氧可能欠飽和。在BOD5測(cè)定前應(yīng)對(duì)這些樣品行攪拌和曝氣，以便使溶解氧調(diào)節(jié)到20℃飽和點(diǎn)左右。
—pH：
應(yīng)調(diào)節(jié)試驗(yàn)水樣的pH為6.7～7.5（點(diǎn)為pH 7.2），BOD5讀數(shù)下降可能是由于正在試驗(yàn)樣品的pH值出了這個(gè)范圍，含有大量酸或堿的樣品BOD5讀數(shù)可能會(huì)低于實(shí)際含量。
酸性或堿性水樣應(yīng)用適當(dāng)濃度的Na0H或H2S04中和。
如果業(yè)廢水中含有酸性或鹽的氧化物，或者需要倍稀釋，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)五日BOD5測(cè)定，可使用pH 7.2的磷酸緩沖液作為稀釋劑。
—溫度：
實(shí)驗(yàn)時(shí)將儀器放大器放置在20℃±1℃的培養(yǎng)箱中。BOD的測(cè)定也能出這溫度范圍，例如，在35℃或37℃時(shí)，測(cè)定BOD所需要的時(shí)間可以縮短為34小時(shí)，其測(cè)定結(jié)果與五日20℃ BOD5測(cè)定相似。提溫度所獲得的BOD值與五日20℃條件下測(cè)定的結(jié)果有很好的相關(guān)性。
如果在采樣時(shí)樣品溫度過(guò)20℃，或樣品溫度不足20℃，可將樣品放在培養(yǎng)箱中恒溫。在樣品測(cè)定前要求對(duì)樣品行處理。
—稀釋：
直讀式BOD5測(cè)定儀測(cè)定范圍為0～1000mg/L。如果試驗(yàn)樣品的BOD5估計(jì)值于1000mg/L可用稀釋水稀釋樣品。所加入的稀釋水也應(yīng)保持為20℃，并曝氣使氧達(dá)到飽和，如需要若干份相同的樣品試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)稀釋足夠量的原水樣，并從稀釋樣中取出與量程對(duì)應(yīng)的體積。例如，當(dāng)試驗(yàn)原水樣稀釋兩倍時(shí)，稀釋倍數(shù)為2；當(dāng)原水樣按1:10稀釋時(shí)，則應(yīng)為10，所測(cè)結(jié)果應(yīng)乘上稀釋倍數(shù)。
—接種：
BOD5實(shí)驗(yàn)要求水樣含有供生物氧化的有機(jī)物和適量的氧化有機(jī)物的需氧細(xì)菌，以及吞食有機(jī)物和增需氧細(xì)菌生長(zhǎng)的其他微生物。如果水樣中根本沒(méi)有或幾乎沒(méi)有這類微生物，就對(duì)水樣按定比例加入這類微生物溶液。這個(gè)過(guò)程與生活污水不同，業(yè)廢水可能不含有足夠量的細(xì)菌以供樣品中所含有機(jī)物的生化分解，如果所測(cè)定的樣品為這種廢水，應(yīng)加入接種溶液。
A接種方法
制備接種溶液
接種溶液
用于接種的溶液為20℃放置24～36小時(shí)的未經(jīng)處理新鮮生活污水的上清液。在下次實(shí)驗(yàn)中，若要使用以前測(cè)定過(guò)的水樣作為接種液應(yīng)經(jīng)濾紙過(guò)濾，這種濾液在冷藏（約20℃）、避光的條件下保存，般在個(gè)月內(nèi)是有效的。將準(zhǔn)備測(cè)定的樣品放入培養(yǎng)瓶中，使用吸管將定量的接種液加入到樣品中（根據(jù)樣品量）。按步驟測(cè)定BOD5，五日后獲得的讀數(shù)可以作為試驗(yàn)樣品真實(shí)的BOD5值。
注意：當(dāng)使用上述方法接種時(shí)。不校正接種的BOD5讀數(shù)。因?yàn)樗尤虢臃N液的量相對(duì)水樣量來(lái)說(shuō)實(shí)在太少了，以致于不影響B(tài)OD5的讀數(shù)。如果上述方法未能引起水樣中有機(jī)物的生物分解，可增加所加入接種液的量。如果由于接種液的加入影響了BOD5讀數(shù)，可將接種液與樣品同時(shí)實(shí)驗(yàn)行平行樣測(cè)定。
接種量常取5％，10％二種
—數(shù)據(jù)處理：
對(duì)于既無(wú)稀釋又無(wú)接種預(yù)處理的樣品，只需將儀器上的汞壓力計(jì)的讀數(shù)讀出，乘上所選量程的標(biāo)尺系數(shù)，即得到樣品BOD5值。
對(duì)于作了稀釋和接種預(yù)處理的樣品，可把汞壓力計(jì)讀數(shù)讀出，樣品實(shí)際BOD5按下面公式計(jì)算：
樣品BOD5讀數(shù)×標(biāo)尺系數(shù)-接種液BOD5讀數(shù)×標(biāo)尺系數(shù)×接種液%
BOD5（mg/L）＝ ×稀釋倍數(shù)
樣品液%
式中：樣品BOD5讀數(shù)——對(duì)應(yīng)樣品的汞壓力計(jì)讀數(shù)，厘米；
接種液BOD5讀數(shù)——對(duì)應(yīng)接種液的汞壓力計(jì)讀數(shù)，厘米；
標(biāo)尺系數(shù)——根據(jù)所選量程范圍從取水樣量表1中查得；
接種液％——體積百分比，％；
樣品液％——體積百分比，％。
例：有污水樣品，估計(jì)其BOD5值過(guò)1000mg/L，因而作了稀釋預(yù)處理，稀釋倍數(shù)為2倍（即份樣品加份稀釋水）選取0～600mg/L檔量程，培養(yǎng)五天后汞壓力計(jì)讀數(shù)8.8厘米汞柱。
8.8×60－0
BOD5值（mg/L）＝ ×2＝1056（mg/L）
例二：有業(yè)廢水水樣估計(jì)其BOD5值約為80mg/L，現(xiàn)有合適的生活污水對(duì)其接種培養(yǎng)測(cè)定，接種量為10％（即廢水水樣：生活污水=9：1）
生活污水的BOD5值約在30mg/L左右，現(xiàn)選取0～50mg/L量程檔，業(yè)廢水選取0～100mg/L量程檔（取樣量按說(shuō)明書(shū)表1提供的各檔量程取樣量分別用量筒量之）平行樣試驗(yàn)。五天后廢水水樣與生活污水水樣汞壓力讀數(shù)分別為7.8厘米汞柱和4.0厘米汞柱。此種廢水BOD5值為：
7.8×10－4.0×5×10％
BOD5值（mg/L）＝ ＝ 84.4（mg/L）
90%
例三、有種業(yè)廢水有毒，估計(jì)BOD5值約700mg/L左右，測(cè)定前對(duì)樣品行了10倍稀釋，同時(shí)用生活污水行接種，接種液BOD5值60mg／L左右，接種量為10％，查表1，經(jīng)過(guò)處理的業(yè)廢水和接種液取0～100mg／L量程檔行取樣試驗(yàn)，培養(yǎng)五天后汞壓力計(jì)讀數(shù)分別為5.2厘米汞柱和6.1厘米汞柱。此種業(yè)廢水BOD5為：
5.2×10－6.1×10×10％
BOD5值（mg/L）＝ ×10＝510（mg/L）
90%
