RNAplant植物RNA提取試劑說明書

RNAplant試劑可從植物組織，特別是富含多酚或淀粉的植物組織中（如馬鈴薯塊莖，白松松針或嫩苗，和西紅柿葉等）提取高純度的總RNA。

每100 ml可處理100 mg組織200次。

保存條件：室溫運(yùn)輸，4℃保存，可保存6-12個(gè)月。

準(zhǔn)備試劑：液氮，研缽，無RNase離心管，5 MNaCl（無RNase水配制），氯仿，異丙醇，75%乙醇（無RNase水配制），無RNase水。

小規(guī)模提取操作步驟：（樣品<0.1 g，使用小規(guī)模提取方法）：

1.取不多于0.1 g植物組織，在液氮中研碎，轉(zhuǎn)移到1.5 ml離心管中，加0.5 ml提取試劑，振蕩至徹底混勻。

注：振蕩不要太劇烈，否則容易導(dǎo)致基因組DNA污染。

2.室溫放置5分鐘。

3.4℃12, 000 rpm離心2-3分鐘，上清轉(zhuǎn)入新的無RNase離心管。

4.上清中加入0.1 ml5 MNaCl（無RNase水配制），溫和混勻。

5.加入0.3 ml氯仿，上下顛倒混勻。

6.4℃12,000 rpm離心10-15分鐘，取上層水相轉(zhuǎn)入新的無RNase離心管。

7.加與所得水相等體積的異丙醇，混勻，室溫放置10分鐘。

8.4℃12,000 rpm離心10-15分鐘。棄掉上清，注意不要倒出沉淀。加1 ml 75%乙醇沖洗沉淀。（沉淀可能很難看見，應(yīng)小心操作。）

9.4℃5000-7000rpm離心3分鐘。倒出液體，注意不要倒出沉淀。剩余的少量液體短暫離心，用槍頭吸出，室溫晾干1-2分鐘至沉淀干燥。

10.加適量無RNase水充分溶解RNA，-70℃保存。

注意事項(xiàng)：

RNAplant有刺激性味道，操作時(shí)請(qǐng)?jiān)谕L(fēng)處進(jìn)行。