你以為生化檢測(cè)僅僅是醫(yī)院做個(gè)小化驗(yàn)?zāi)敲春?jiǎn)單？too naive!!
生化檢測(cè)又稱(chēng)臨床化學(xué)，是在研究人體健康和疾病的生物化學(xué)過(guò)程變化的基礎(chǔ)上，利用物理學(xué)、化學(xué)、生物學(xué)、病理學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)的理論與技術(shù)，通過(guò)檢測(cè)人體血液、尿液、腦脊液等樣本中化學(xué)物質(zhì)的量與質(zhì)的變化，為臨床醫(yī)生或研究者提供疾病診斷、病情監(jiān)測(cè)、療效觀察、判斷預(yù)后以及健康評(píng)價(jià)等信息，最終判斷被檢者是否存在潛在疾病或排除某些疾病、揭示疾病變化以及藥物治療對(duì)機(jī)體生物化學(xué)過(guò)程影響的一門(mén)學(xué)科。
在臨床上，我們的醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)就經(jīng)常要用到生化檢測(cè)，而在科研方面，生化檢測(cè)更是為物質(zhì)含量測(cè)定、酶活力快速檢測(cè)、藥物研發(fā)等方面提供各種便捷。
一起來(lái)看看，生化檢測(cè)的發(fā)展歷程:
1904年，F(xiàn)olin用目視比色的方法測(cè)定肌酐
20世紀(jì)30年代，光電比色計(jì)法出現(xiàn)
20世紀(jì)50年代，分析技術(shù)如離心、層析、電泳、免疫分析、光譜分析、電化學(xué)發(fā)光等技術(shù)出現(xiàn)
20世紀(jì)70年代，放射免疫分析技術(shù)、化學(xué)發(fā)光技術(shù)和電化學(xué)發(fā)光技術(shù)快速發(fā)展
20世紀(jì)80年代，聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)將生物化學(xué)檢驗(yàn)與分子生物學(xué)檢驗(yàn)向前推進(jìn)了一大步。
20世紀(jì)90年代，生物芯片技術(shù)飛速發(fā)展
21世紀(jì)，酶學(xué)分析技術(shù)建立，為生物化學(xué)的快速化、特異化奠定了基礎(chǔ)。
生化檢測(cè)的檢測(cè)原理:
生化試劑盒檢測(cè)的本質(zhì)就是某物質(zhì)化學(xué)變化的顯色反應(yīng)，其反應(yīng)過(guò)程可以劃分為四個(gè)區(qū)：延遲區(qū)、等速區(qū)、過(guò)渡區(qū)和平衡區(qū)，以時(shí)間為橫坐標(biāo)、吸光度為縱坐標(biāo)作圖，如下所示：
延遲區(qū)：無(wú)規(guī)律可尋。等速區(qū)：對(duì)應(yīng)的是速率法，一般應(yīng)用于酶類(lèi)項(xiàng)目，可以使用因數(shù)法來(lái)計(jì)算待測(cè)濃度。
過(guò)渡區(qū)：對(duì)應(yīng)的是固定時(shí)間法，目的是解決某些化學(xué)反應(yīng)的非特異性問(wèn)題，提高準(zhǔn)確度。
平衡區(qū)：對(duì)應(yīng)的是終點(diǎn)法，主要是測(cè)定某物質(zhì)在樣本中的含量。
某物質(zhì)與顯色劑反應(yīng)后，形成區(qū)別于自身的顏色反應(yīng)，在某一波長(zhǎng)下，吸光度的強(qiáng)弱與物質(zhì)的含量呈正比關(guān)系，其顯色反應(yīng)的示意圖如下：
生化檢測(cè)試劑盒和ELISA檢測(cè)試劑盒對(duì)比
現(xiàn)在，很多公司都將測(cè)定特定指標(biāo)所需要的試劑制成可直接使用或簡(jiǎn)單配制即可使用的固體或液體，這就是——生化檢測(cè)試劑盒。
一般這種試劑盒會(huì)配備詳細(xì)的操作說(shuō)明，為廣大實(shí)驗(yàn)小白們省去查詢(xún)文獻(xiàn)資料、采購(gòu)各種化學(xué)試劑、摸索試驗(yàn)條件、優(yōu)化實(shí)驗(yàn)體系等所需要的時(shí)間和精力，同時(shí)，也大大節(jié)約了樣本量，獲得更可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
與實(shí)驗(yàn)室常用的ELISA試劑盒對(duì)比發(fā)現(xiàn)，生化檢測(cè)試劑盒有著不可替代的作用，可以和ELISA試劑盒互為補(bǔ)充。
生化檢測(cè)試劑盒一般檢測(cè)領(lǐng)域：
氧化與抗氧系列、谷胱甘肽系列、氨基酸代謝系列、脂質(zhì)代謝系列、氮代謝系列、輔酶I系列、輔酶II系列、神經(jīng)遞質(zhì)系列、維生素系列、糖代謝系列、離子系列、酯酶系列等
生化檢測(cè)試劑盒可以檢測(cè)的樣本類(lèi)型的：
體液：血清(漿)、尿液、唾液等
組織：動(dòng)植物組織
食品：果汁、蜂蜜、牛奶、紅酒、巧克力等
其它：保健品、化妝品
放一下學(xué)霸姐姐最近做的一個(gè)生化檢測(cè)實(shí)驗(yàn)：
使用的是Elabscience家的總超氧化物歧化酶(SOD)比色法測(cè)試盒(WST-1法，貨號(hào)：E-BC-K020）
性能參數(shù)：
標(biāo)曲曲線(僅供參考哈)：
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?zhuān)喝IGMA公司生產(chǎn)的SOD(貨號(hào)S7571-75KU)標(biāo)準(zhǔn)品用PBS(0.01 M，pH 7.4)稀釋不同的濃度，測(cè)定相應(yīng)的OD值，按公式計(jì)算抑制率如下表:
實(shí)例分析(僅供參考哈)：
按照操作過(guò)程，測(cè)定大鼠血清(稀釋20倍，加樣量為20 μL)、大鼠肝組織(10%組織勻漿的蛋白含量10.67 mg/mL，稀釋360倍，加樣量為20 μL)、西紅柿(20%組織勻漿的蛋白含量2.44 mg/mL，稀釋10倍，加樣量為20 μL)和HepG2細(xì)胞(蛋白含量3.18 mg/mL，稀釋30倍，加樣量為20 μL)中的SOD活力。
不得了了，學(xué)霸姐姐看發(fā)現(xiàn)這家的一個(gè)產(chǎn)品居然有11分的文獻(xiàn)引用！
Lee H Y, Back K. Melatonin induction and its role in high light stress tolerance in Arabidopsis thaliana [J]. Journal of pineal research, 2018.
這個(gè)J Pineal Res期刊，2018年IF=11.613，也是很牛了??！
學(xué)霸姐姐大致看了一下，這篇文章主要是講擬南芥中褪黑激素的誘導(dǎo)及其在高光脅迫下作用，文獻(xiàn)報(bào)道了植物為了防止ROS氧化損傷，進(jìn)化出一系列的酶和非酶抗氧化防御系統(tǒng)，抗壞血酸過(guò)氧化物酶(APX)就是其中是一種酶。
所使用的產(chǎn)品是APX酶活檢測(cè)試劑盒（貨號(hào)：E-BC-K353）
嘖嘖，確實(shí)很不錯(cuò)，有相關(guān)需求的朋友可以自行去翻閱，學(xué)霸姐姐只是一個(gè)搬運(yùn)工哈。
好了，關(guān)于生化檢測(cè)，學(xué)霸姐姐只能幫你到這里了，剩下的，只能靠你自己了！
