目的
在較短的分析時間內(nèi)，通過盡可能簡單的樣品制備，以具有成本效益的方式，成功測定多種果汁中的糖含量。
背景
近年來，研究表明：含糖軟飲料與肥胖、冠心病問題和II型糖尿病發(fā)展有關(guān)，因此，利用純果汁代替含糖軟飲料的健康選擇備受人們推崇。此外，據(jù)報道：某些果汁如石榴汁，由于含有抗氧化成分而對健康有益，導(dǎo)致這類產(chǎn)品的價格偏高。
為確保產(chǎn)品質(zhì)量并符合監(jiān)管機(jī)構(gòu)的要求，果汁行業(yè)必須對產(chǎn)品進(jìn)行檢測使其符合特定標(biāo)準(zhǔn)。其中一項(xiàng)指標(biāo)即為糖含量。果糖、蔗糖和葡萄糖是果汁分析中的重要分析物。它們的含量和相對比率各不相同，可作為識別不同品種的標(biāo)識。
HPLC結(jié)合蒸發(fā)光散射(ELS)檢測器，長期以來，一直被公認(rèn)為是進(jìn)行此類分析的有效技術(shù)。氨基柱一直以來被用于糖分離。但是，這可能會形成希夫堿，導(dǎo)致色譜柱使用壽命縮短和糖定量不準(zhǔn)確。
采用性能可靠的XBridge? BEH Amide 色譜柱，結(jié)合經(jīng)證實(shí)的Alliance? HPLC系統(tǒng)技術(shù)，對五種食用糖進(jìn)行快速分析和定量。
沃特世(Waters?)專利酰胺基色譜柱可防止希夫堿的形成，消除了上述問題。本研究顯示了沃特世XBridge BEH Amide XP色譜柱在糖分析中的通用性。
解決方案
各種果汁購買于當(dāng)?shù)厥袌?。樣品制備只需要：將這些果汁樣品通過高速離心，除去果肉及其它不溶性物質(zhì)。取每種果汁的部分上清液，并用1:50水/乙腈混合液進(jìn)行稀釋。
利用配有2424蒸發(fā)光散射檢測器的Alliance HPLC系統(tǒng)進(jìn)行分析。由于目標(biāo)分析物無發(fā)色團(tuán)，因而不適合UV和熒光檢測，選用更為合適的ELS檢測?？蛇M(jìn)行梯度洗脫，以對相關(guān)化合物如其它糖類、糖醇類(山梨糖醇)以及高碳低聚物進(jìn)行分離。所用色譜柱為XBridge BEH Amide XP 4.6×100 mm，2.5 μm色譜柱。梯度洗脫所用的二元流動相由水和乙腈組成，以三乙胺(TEA)為改性劑。用糖混合儲備液的稀釋液，建立六個點(diǎn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線，對樣品進(jìn)行定量。圖2顯示了四種食用糖和山梨糖醇的分離，山梨糖醇是一種糖醇，在某些品種中可作為不合格品標(biāo)志物。各種果汁的分析結(jié)果見圖3。值得注意的是，蘋果汁中含有微量的山梨糖醇。
總結(jié)
使用XBridge BEH Amide色譜柱在不到7.5 min的時間內(nèi)即可完成果汁中的糖分析。利用性能可靠的XBridge BEH Amide XP色譜柱，參照本方法，可對果汁中的糖進(jìn)行準(zhǔn)確的定量分析經(jīng)證實(shí)的Alliance HPLC系統(tǒng)技術(shù)對果汁中的糖進(jìn)行準(zhǔn)確定量，以實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確的溶劑輸送和可重復(fù)的進(jìn)樣性能，并且能夠創(chuàng)建非線性梯度，執(zhí)行簡單的ELS檢測，從而符合了簡化樣品制備，縮短分析時間和提高成本效益的目標(biāo)。
