首先人工合成可以被待測凝血活酶催化裂解的化合物，且化合物連接上產(chǎn)色物質(zhì)，在檢測過程中產(chǎn)色物質(zhì)可被解離下來，使被檢樣品中出現(xiàn)顏色變化，根據(jù)顏色變化可推算出被檢凝血活酶的活性。產(chǎn)色物質(zhì)一般選用連接對硝基苯胺（PNA）。游離的PNA呈黃色，其測定波長選用405nm。在這一波長下，其它物質(zhì)對光的吸收小于PNA對光吸收的1％。具體檢測方法即可采用動態(tài)法、也可采用終點法。動態(tài)法即是連續(xù)記錄樣品的吸光度變化，算出單位時間吸光度的變化量，并以每分鐘吸光度的變化來報告結(jié)果。終點法即是指在活性酶同產(chǎn)色物質(zhì)作用一段時間后，加入乙酸終止反應(yīng)，檢測此段時間內(nèi)吸光度的變化，進(jìn)而推算出待檢酶的活性。凝血儀上多數(shù)采用動態(tài)法，因為它比終點法簡單、結(jié)果更為準(zhǔn)確。其優(yōu)點主要表現(xiàn)在：
用酶學(xué)方法直接定量、測定結(jié)果準(zhǔn)確、重復(fù)性好、便于自動化和標(biāo)準(zhǔn)化、所需樣品量小。

凝血儀使用產(chǎn)色物質(zhì)在檢測血栓／止血指標(biāo)時大致可分成三種模式。
①對酶的檢測：
即在含酶的樣品中直接加入產(chǎn)色物質(zhì)，因為酶可裂解產(chǎn)色物質(zhì)釋放PNA，監(jiān)測由于PNA釋放而導(dǎo)致被檢樣品在405nm處光吸收的變化，就可推算樣品中酶的活性。如對凝血酶、纖溶酶等的檢測。
②對酶原的檢測：
要對某種酶原進(jìn)行測定，必須先用激活劑將其激活，使其活化位點暴露，才可將產(chǎn)色物質(zhì)上的PNA裂解下來。加入的激活劑必須過量，因為只有這樣才能使酶原被全部激活，酶原的量才會同樣品中酶的活性成一定的數(shù)量關(guān)系。樣品中酶的活性可通過PNA釋放，即樣品吸光度的變化反應(yīng)出來，由此則可推算出樣品中酶原的含量。
③對酶抑制物的檢測：
首先往待檢樣品中加入過量對應(yīng)的酶中和該抑制物，剩余的酶可裂解產(chǎn)色物質(zhì)釋放PNA，監(jiān)測由于PNA釋放而導(dǎo)致光吸收的變化，就可測出酶的活性，進(jìn)而可推算出樣品中抑制物的含量。如對抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）等。

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