脂質(zhì)(Lipid)是中性脂肪、類脂及其衍生物的總稱，其共同的物理特性是不溶于水，易溶于有機(jī)溶劑(如乙醇、等)。人體的脂肪主要有兩種：1、儲(chǔ)存脂肪，如中性脂肪，主要分布于皮下、腎、胰腺等部位。2、結(jié)構(gòu)脂肪，如類脂(磷脂、糖脂、膽固醇等)，主要分布于細(xì)胞內(nèi)。中性脂肪(Neutral fat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油組成的脂類，呈中性。中性脂肪是儲(chǔ)存能量的方式之一，在氧化時(shí)釋放出能量。中性脂肪染色經(jīng)常采用蘇丹Ⅱ、蘇丹Ⅲ、蘇丹Ⅳ、蘇丹、油紅O法等。傳統(tǒng)方法采用蘇丹染料，最近發(fā)現(xiàn)偶氮染料油紅O更適合脂肪的染色。油紅O是很強(qiáng)的脂溶劑和染脂劑，較易與甘油三脂結(jié)合呈小脂滴狀，

　　與磷脂結(jié)合力稍差。其染色原理一般認(rèn)為是物理上的溶液作用或吸附作用，借溶液作用使脂肪染色。染料在冰凍切片內(nèi)脂質(zhì)的溶解度較原溶劑中的溶解度更大，所以在染色時(shí)染料就從有機(jī)溶劑轉(zhuǎn)移入脂質(zhì)而使脂肪染色。

　　改良油紅O染色液主要用于顯示組織器官的脂肪變性和類脂質(zhì)的異常沉著，常發(fā)生于肝、腎、心等實(shí)質(zhì)臟器的脂肪變性，細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)多數(shù)中性脂肪滴;鑒別和診斷脂肪組織中所發(fā)生的腫瘤及其性質(zhì)。標(biāo)本不采用含有乙醇的固定液(如需要固定可采用10%福爾馬林)，樣本不采用石蠟切片，需用冰凍切片或碳蠟切片，脂肪的陽性染色結(jié)果呈橘黃至紅色，但具體顏色因脂質(zhì)濃度而定。

　　產(chǎn)品組成：

　　產(chǎn)品

　　規(guī)格

　　2×50ml

　　2×100ml

　　儲(chǔ)存

　　試劑(A)：改良

　　Oil Red O Stain

　　A1: Oil Red O Stain A

　　30ml

　　60ml

　　4℃，避光

　　A2: Oil Red O Stain B

　　20ml

　　40ml

　　4℃

　　充分搖勻A1、A2后，按A1、A2=3:2比例混合靜置10min, 即為改良Oil Red O Stain，不宜提前配制;如有條件盡量進(jìn)行過濾，以免色素沉淀，造成假陽性。

　　試劑(B)： Mayer 蘇木素染色液

　　50ml

　　100ml

　　4℃，避光

　　使用說明書

　　1份

　　自備材料：

　　1、60%異丙醇

　　2、蒸餾水

　　3、1%鹽酸溶液

　　甘油明膠或阿拉伯糖膠

　　操作步驟(僅供參考)：

　　1、冰凍切片厚度6～10μm，不固定或10%福爾馬林固定10min后水洗。

　　2、入蒸餾水中稍沖洗。

　　3、 入60%異丙醇浸洗20～30s。

　　4、 入改良油紅O染色液(加蓋)，密閉染色10～15min。

　　5、 分色： 入60%異丙醇稍洗以便去除染液。

　　6、 入蒸餾水稍微清洗。

　　7、 入 Mayer 蘇木素染色液，復(fù)染核1～2min。

　　8、 (可選)1%鹽酸溶液稍微分化一下。

　　9、 (可選)自來水漂洗10min或稀碳酸鋰溶液促藍(lán)。

　　10、 入蒸餾水稍微清洗。

　　11、 用濾紙吸干周圍水分。甘油明膠或阿拉伯糖膠封固。

　　染色結(jié)果：

　　中性脂肪

　　橙紅色或者橘紅色

　　細(xì)胞核

　　藍(lán)色

　　注意事項(xiàng)：

　　1、改良油紅O染色液不夠穩(wěn)定，易產(chǎn)生沉淀，不宜提前配制。

　　2、如果60%的異丙醇不易獲得，亦可采用70%的乙醇。

　　3、由于脂肪易溶于有機(jī)溶劑，所以顯示脂肪一般不能像石蠟切片一樣處理，而通過冰凍切片染色來顯示。

　　4、作脂肪染色的冰凍切片不可太薄，過薄的切片常會(huì)使脂質(zhì)丟失。

　　5、Mayer蘇木素染色液復(fù)染時(shí)間不能過長。

　　6、染色結(jié)果不能長期保存，應(yīng)盡快觀察及照相。

　　7、甘油明膠封固的樣本，保存時(shí)間不長。如需長期保存，可以在蓋玻片與載玻片交界的邊緣用中性樹膠封閉。

　　有效期：12個(gè)月有效。