一、作品簡(jiǎn)介
器官移植是20世紀(jì)人類醫(yī)學(xué)科學(xué)的重大進(jìn)展，自從上世紀(jì)60年代開始在臨床應(yīng)用以來，器官移植得到了突飛猛進(jìn)的發(fā)展。目前器官移植是治療終末期器官衰竭唯一有效的根治手段，并已經(jīng)成為21世紀(jì)醫(yī)學(xué)發(fā)展的主要方向之一。然而我國(guó)器官移植的醫(yī)學(xué)教育還較落后，目前主要依靠少量的書本和課堂教學(xué)，由于受教學(xué)手段的限制，實(shí)驗(yàn)教學(xué)嚴(yán)重缺乏，器官移植教學(xué)的質(zhì)量和效果均不理想，無法滿足我國(guó)器官移植的發(fā)展需要。
目前雖然大鼠肝、腎同種異體移植模型是器官移植實(shí)驗(yàn)教學(xué)的理想動(dòng)物模型，但是大鼠同種異體移植模型手術(shù)難度大、學(xué)習(xí)周期長(zhǎng)、成功率低、重復(fù)性差，尤其不適用于短時(shí)間的大批量實(shí)驗(yàn)。針對(duì)這一情況，我研制開發(fā)了CZ-1型大鼠肝、腎離體機(jī)械灌注系統(tǒng)，該系統(tǒng)簡(jiǎn)單易行，技術(shù)要求較低，通用性好，可進(jìn)行大批量實(shí)驗(yàn)，特別適用器官移植的實(shí)驗(yàn)教學(xué)。該系統(tǒng)可用于：①移植器官的切取;②器官保存(單純低溫保存和機(jī)械灌注保存);③移植器官缺血再灌注等器官移植相關(guān)內(nèi)容的實(shí)驗(yàn)教學(xué)。
1. CZ-1 型離體灌注系統(tǒng)： CZ-1 型離體灌注系統(tǒng)見圖1。該循環(huán)灌注系統(tǒng)包括：一個(gè)恒溫水浴鍋，一個(gè)數(shù)顯恒流泵，一個(gè)四口燒瓶，一個(gè)液體流量計(jì)，一個(gè)自制水柱式壓力計(jì)，一個(gè)由玻璃漏斗及玻璃培養(yǎng)皿組成的器官盛放皿、一套鐵架臺(tái)和包括過濾及除泡裝置的一套循環(huán)管路。循環(huán)管路的一端連接直徑1.2mm注射針頭(肝臟)或0.6 mm注射針頭(腎臟)，通過與門靜脈插管相連進(jìn)入門靜脈或直接插入腎動(dòng)脈，另一端同四口燒瓶的灌注液回收口相連。四口燒瓶作為灌注液保存和收集裝置，置于恒溫水浴鍋中，四口分別為：灌注液流出口，灌注液回收口，氣體灌入口和氣體排出口。通過調(diào)節(jié)泵的轉(zhuǎn)速來控制灌注液的流量，而流量計(jì)和壓力計(jì)則分別監(jiān)測(cè)灌注過程中流量和壓力的變化。
2. 器官切取(以肝臟切取為例)：大鼠肝臟切取過程可模擬臨床供者器官的切取。大鼠麻醉后將固定在自制的手術(shù)臺(tái)上，背部墊一5ml注射器，使上腹部抬起。腹部備皮、劍突下至恥骨上作大“十”字切口進(jìn)腹。剪斷肝周各韌帶及肝胃韌帶，將肝臟向上翻起，用濕棉片覆蓋肝臟加以保護(hù);分離膽總管，在距肝門分叉0.5cm處的膽總管前壁作斜切口，插入膽道支架管， 用6-0線結(jié)扎固定，剪斷遠(yuǎn)端膽管;打開肝十二指腸韌帶，從腸系膜上靜脈和脾靜脈匯合處游離門靜脈至肝門部，帶線牽引備用;以濕鹽水紗布覆蓋腸管并推向左側(cè)腹部，暴露左側(cè)后腹膜，剪開后腹膜，以棉簽鈍性分離，游離左腎靜脈水平以下的腹主動(dòng)脈，直至腹主動(dòng)脈分叉處，以備灌注插管;經(jīng)肝下下腔靜脈注入含肝素100單位的生理鹽水1m1，使供體肝素化;用血管夾于左腎靜脈稍下方阻斷腹主動(dòng)脈，腹主動(dòng)脈分叉處上方剪一斜切口，插入靜脈留置針，留置針連接距離高度為lm的灌注吊瓶，內(nèi)含4℃ 乳酸林格液;打開膈肌，于膈肌水平之上鉗夾胸主動(dòng)脈，移去阻斷腹主動(dòng)脈值血管夾，開始滴注乳酸林格液，持續(xù)1min，與此同時(shí)在左腎靜脈上方和胸腔內(nèi)分別切斷肝上、下的下腔靜脈，讓灌洗液順利流出，使供肝呈現(xiàn)質(zhì)地均勻黃白色;進(jìn)行灌注的同時(shí)用4℃冷乳酸鈉林格液不斷澆淋肝臟;隨后門靜脈插入直徑2mm聚乙烯導(dǎo)管并牢固結(jié)扎固定。
將200ml離體灌注液倒入四口燒瓶中，如進(jìn)行缺血再灌注的實(shí)驗(yàn)教學(xué)則將水浴溫度控制在60-65℃之間(根據(jù)環(huán)境溫度調(diào)整)，而如進(jìn)行器官低溫機(jī)械灌注保存的教學(xué)則采用4℃冰水浴。開動(dòng)恒流泵，調(diào)整灌注液循環(huán)流速為20ml/min(約3ml/min? g 肝組織)，同時(shí)打開95%O2-5%CO2混合氣瓶開始?xì)怏w氧合，調(diào)整氣體流量為1L/min。循環(huán)20min后溫度計(jì)測(cè)定灌注液入肝端溫度，通過調(diào)整水浴溫度，維持循環(huán)管路入肝端溫度為37℃。再將肝臟置于玻璃培養(yǎng)皿中，將門靜脈插管與循環(huán)管路入肝端相連，注意排出管路中的氣泡以防栓塞。灌注液自肝上下腔靜脈流出后，部分存留在玻璃培養(yǎng)皿中，使肝臟懸浮在灌注液中，余灌注液回流四口燒瓶。肝臟機(jī)械灌注情況，腎臟機(jī)械灌注情況。
作品名稱：CZ-1型大鼠肝、腎離體機(jī)械灌注系統(tǒng)
完成單位：第二軍醫(yī)大學(xué)第二附屬醫(yī)院
