顯色劑(在30℃溫度下培養(yǎng)15分鐘),將100微升底物搖勻倒入比色皿中即可放入儀器。
當(dāng)抑制率≥50%時(shí)，表示蔬菜中有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥超過國家標(biāo)準(zhǔn)，抑制率≥50%的樣品需要重復(fù)檢驗(yàn)2次以上。
空白對照測試：
第一步：按下“校準(zhǔn)”鍵。
第二步：打開儀器門蓋，將裝有對照液的比色皿放入指定的通道中，蓋好儀器蓋，按下“空白”鍵，儀器進(jìn)行空白檢測倒計(jì)時(shí)。
第三步：空白對照檢測結(jié)束后，儀器自動顯示空白樣品對照測試結(jié)果Ao，打開儀器蓋取出對照。
樣品測試;
第一步：按下“校準(zhǔn)”鍵。
第二步：打開儀器門蓋，將裝有樣品液的比色皿放入指定的通道中，蓋好儀器蓋，按下“檢測”鍵，儀器進(jìn)行樣品檢測倒計(jì)時(shí)。
第三步：檢測結(jié)束后，儀器自動顯示指定通道農(nóng)藥殘留檢測樣品的測試結(jié)果Ai，儀器自動保存對照對照值和檢測結(jié)果，打開儀器蓋取出樣品。
【注】樣品的抑制率在40%--50%之間為可疑農(nóng)殘超標(biāo)樣品，若重復(fù)數(shù)次后抑制率仍大于50%為農(nóng)殘超標(biāo)樣品，表明被測樣品的農(nóng)藥殘留可能超過安全的界定標(biāo)準(zhǔn)，建議用氣象色譜等儀器做進(jìn)一步的檢測。
檢測結(jié)果打印:在顯示農(nóng)藥殘留檢測結(jié)果的界面，按“打印”鍵，儀器開始打印。
2.結(jié)果判定
結(jié)果以酶被抑制的程度(抑制率)表示。
當(dāng)蔬菜樣品提取液對酶的抑制率≥50%時(shí)，表示蔬菜中含有有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥存在。抑制率≥50%的樣品需要重復(fù)檢測2次以上。
對抑制率≥50%的樣品，可用其它方法進(jìn)一步確定具體農(nóng)藥品種和含量。
3.酶抑制法技術(shù)指標(biāo)
(1)靈敏度指標(biāo)
酶抑制率法的最低檢測限應(yīng)達(dá)到以下指標(biāo)：甲胺磷0.8mg/L，敵百蟲0.25mg/L，呋喃丹0.002mg/L。
(2)符合率
在檢出的抑制率≥50%的10份以上樣品中，經(jīng)氣想色譜法驗(yàn)證，符合率應(yīng)在80%以上。
特別提示：
1.儀器重新開機(jī)后，必須重新制作空白數(shù)值。
2.試劑的保存及注意事項(xiàng)
本試劑適用的國家標(biāo)準(zhǔn)為：GB/T5009.199-2003。
請?jiān)趦龈蔂顟B(tài)時(shí)用冷凍的方式保存，而溶液狀態(tài)時(shí)用冷藏的方式保存。具體保存期限如下：
|
試劑保存期限
及方式
|
凍 干 劑
|
溶 液 劑
|
||
|
常溫放置
|
冷凍保存
（-20℃以下）
|
常溫放置
|
冷藏 （4℃）
|
|
|
酶液
|
1～2周
|
一年
|
2～4天
|
7～10天
|
|
底物
|
1～2周
|
一年
|
2～4天
|
7～10天
|
|
顯色劑
|
避光保存 一年
|
避光保存 半年
|
||
|
提取液
|
無期限
|
無期限
|
||
3.韭菜、生姜、蔥、蒜、辣椒、胡羅卜等蔬菜中，含有破壞酶活性的物質(zhì)，處理這類樣品時(shí)，不要剪的太碎、浸提時(shí)間過長，必要時(shí)可采取整株蔬菜浸提。
4.農(nóng)藥濃度與抑制率對照表
(實(shí)驗(yàn)條件：37℃)
|
甲胺磷
|
濃度(μg/ml)
|
0.4
|
0.8
|
1.6
|
|
|
|
|
抑制率
|
35.0
|
52.0
|
69.0
|
|
|
|
|
|
氧樂果
|
濃度(μg/ml)
|
0.4
|
0.6
|
0.8
|
1.2
|
1.6
|
3.75
|
|
抑制率
|
26.4
|
29.4
|
36.7
|
52.7
|
59.6
|
76.3
|
|
|
敵百蟲
|
濃度(μg/ml)
|
0.1
|
0.15
|
0.2
|
0.25
|
0.4
|
0.5
|
|
抑制率
|
13.6
|
22.9
|
37.2
|
50.6
|
63.9
|
73.9
|
|
|
呋喃丹
|
濃度(μg/ml)
|
0.001
|
0.002
|
0.003
|
0.004
|
0.006
|
0.008
|
|
抑制率
|
25.2
|
50.3
|
|
