一、透析和超濾 (Dialysis and Ultrafiltration)

　　1、透析

　　是利用蛋白質(zhì)等生物大分子不能透過半透膜而進(jìn)行純化的一種方法。脫鹽透析是應(yīng)用最廣泛的一種透析方法。將含鹽的生物大分子溶液裝入透析袋內(nèi),將袋口扎好放入裝有蒸餾水的大容器中，并不斷攪拌使蒸餾水保持流動(dòng)。經(jīng)過一段時(shí)間后，小分子鹽類透過半透膜進(jìn)入蒸餾水中，使膜內(nèi)外鹽濃度達(dá)到平衡。如在透析過程中更換幾次大容器中的液體，可以達(dá)到使生物大分子溶液脫鹽的目的。平衡透析也是常用的透析方法之一。方法是將裝有生物大分子的透析袋裝入盛有一定濃度的鹽溶液或緩沖液的大容器中，經(jīng)過透析，袋內(nèi)外的鹽濃度或緩沖液pH 一致，從而有控制地改變被透析溶液的鹽濃度或pH。如將透析袋放入高濃度吸水性強(qiáng)的多聚物溶液中，透析袋內(nèi)溶液中的水便迅速被袋外多聚物所吸收，從而達(dá)到使袋內(nèi)液體濃縮的目的。這種方法稱為“反透析”?？捎米龇赐肝龅亩嗑畚镉芯垡叶?Polyethylene Glycol, PEG)、聚乙烯吡咯烷酮(Polyvinyl Pyrolidone,PVP)、右旋糖、蔗糖等。透析用的半透膜種類很多，玻璃紙、棉膠、動(dòng)物膜、皮紙等都可用來制作透析袋。上海創(chuàng)賽科技提供聚乙烯吡咯烷酮40000，PVP40000 (Polyvinylpyrrolidone)，商品編號：B11000373-500g，價(jià)格400元。

　　2、超濾法

　　是利用具有一定孔徑的微孔濾膜，對生物大分子溶液進(jìn)行過濾(常壓、加壓或減壓)，使大分子保留在超濾膜上面的溶液中，小分子物質(zhì)及水過濾出去，從而達(dá)到脫鹽、更換緩沖液或濃縮的目的。這種利用超濾膜過濾分離大分子和小分子物質(zhì)的方法叫做超濾法。

　　二、減壓濃縮冷凍干燥

　　因?yàn)樯锎蠓肿油ǔＳ鰺岵环€(wěn)定，極易變性，濃縮和干燥生物大分子不能用加熱蒸發(fā)的方法。因此減壓濃縮和冷凍干燥已成為生物大分子制備過程常用的濃縮干燥技術(shù)。低壓凍干法是使蛋白質(zhì)溶液在容器壁上冷凍，同時(shí)讓液體在真空中升華，以得到凍干的樣品。通過冷凍干燥所得的產(chǎn)品能夠保持生物大分子物質(zhì)的天然性質(zhì)，還具有疏松，易于溶解的特性，便于保存和應(yīng)用。這是保存生物大分子最常用和最好的方法。

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