【試劑】
1、蘇丹黑染色液
將蘇丹黑B加到無水乙醇中至飽和，搖蕩使乙?；Ｓ们斑^濾。上海創(chuàng)賽科技提供4197-25-5，蘇丹黑B，GR ，商品編號：D16-1032969-100G，價(jià)格431元。
2、巴比妥緩沖液
稱取巴比妥鈉15.4g、巴比妥2.76g及EDTA0.29g，加水溶解后再加蒸餾水至1000mL(pH為8.6，離子強(qiáng)度0.075)，為電極緩沖液。上海創(chuàng)賽科技提供巴比妥酸，Barbituric acid，99.5%,用于糠醛衍生物的比色分析及氰化物測定，67-52-7 ,商品編號：C16-B10490-25g，價(jià)格290元。
3、凝膠緩沖液
取三羥甲基氨基甲烷1.212g、EDTA0.29g及NaCl5.85g，用蒸餾水溶解后，稀釋至1000mL，pH為8.6。上海創(chuàng)賽科技提供77-86-1,三羥甲基氨基甲烷,Tris>99%,分子生物學(xué)級,商品編號：C84-3739-100g，價(jià)格65元。
4、瓊脂糖凝膠
稱取瓊脂糖0.45 g溶于50 mL凝膠緩沖液中，再加水50 mL。在水浴中加熱至沸，待瓊脂糖完全溶解后，立即停止加熱。
【操作】
1、預(yù)染血清
血清0.2mL中加蘇丹黑染色液0.2mL，混合置37℃水浴中染色30分鐘，離心(2000轉(zhuǎn)/分)約5分鐘。以除去懸浮于血清中染料沉渣。
2、制備瓊脂糖凝膠板
將已配制好的0.5%瓊脂糖凝膠于沸水浴中加熱融化，用吸管吸取凝膠溶液澆注在載玻片上，約3 mL。靜置半小時(shí)后凝固(天熱時(shí)需延長，也可放入冰箱中數(shù)分鐘以加速凝固)。
3、點(diǎn)樣
將剪好的濾紙條對折，以折邊在距凝膠一端2cm處切一點(diǎn)樣口。將毛細(xì)管插入預(yù)染好的血清中，待吸入部分血清后，取毛細(xì)管使其有樣品的一端靠于點(diǎn)樣口端部，?？?秒左右。
4、電泳
將凝膠板平放入電泳槽中，使加樣端接在陰極一側(cè)，用四層濾紙或紗布做成“引橋”，敷于膠板的兩端，各搭住凝膠板約1cm左右，“引橋”的另一端浸于電泳槽內(nèi)的巴比妥緩沖液中。接通電源，首先調(diào)節(jié)電流為3-4mA/凝膠板，電泳10-15分鐘;然后調(diào)節(jié)電流為6-7mA/凝膠板，電泳30-40分鐘，即可觀察到分離的區(qū)帶。
5、保留電泳圖譜
可將電泳后的凝膠板(連同載玻片)放入清水中浸泡脫鹽2小時(shí)，然后放烘箱(80℃左右)中烘干即可。
【注意事項(xiàng)】
1、電泳樣品應(yīng)為新鮮的空腹血清。
2、加熱溶化瓊脂時(shí)，須防止水份蒸發(fā)過多。瓊脂糖凝膠最好隨用隨制，以免凝膠表面干燥，影響分離效果。
3、制作凝膠板時(shí)瓊脂糖濃度一般選用0.5%左右為宜，高于1%以上α-脂蛋白部分較緊密，β和前β-脂蛋白部分不夠清晰;低于4.5%則凝固性較差，圖譜不清。
4、點(diǎn)樣口要大小適宜，邊緣整齊、光滑，否則會(huì)影響電泳圖譜。
5、在α-脂蛋白前若出現(xiàn)較淺區(qū)帶，可列為前α-脂蛋白。
【正常參考范圍】
α-脂蛋白 20~30%
β-脂蛋白 20~30%
前β-脂蛋白 0~28%
乳糜微?！ ? (-)
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