隨著新冠核酸檢測的日常化，qPCR這一分子診斷領域的前沿技術也走進了大眾視野，這一技術相比原本的傳統(tǒng)PCR有著諸多技術優(yōu)勢使其在疫情中脫穎而出成為全球范圍內核酸檢測的金標準。它到底有什么優(yōu)勢使得它可以普遍推廣且保持優(yōu)異的可靠性？
qPCR的優(yōu)勢
1.風險低：全程只開蓋兩次，實驗室污染風險小
2.相比mNGS繁瑣的操作步驟，操作較為簡單，更加容易推廣
3. 速度快：擴增的DNA在qPCR反應進行的同時就被檢測出來，所以不需要像傳統(tǒng)PCR那樣在之后單獨檢測（如在瓊脂糖凝膠上）。
4. 效率高：qPCR被認為是一種高xiao率的方法，與液體處理自動化站配合，它可在短時間內處理大量的樣品。
5. 靈敏度高：qPCR能夠分辨出目標DNA分子數(shù)量的2倍差異，它可以檢測到低至只有幾個分子的初始DNA。與PCR相比，只要1/1000的量就可以了。
6. 量化范圍廣：可以在幾個數(shù)量級上進行廣泛的量化
7. 重現(xiàn)性：通常被認為是具有高度重現(xiàn)性的。
qPCR的應用
很多小伙伴可能只是通過核酸檢測，對qPCR產生了基礎的認識，但它的應用實際上可并不局限于用于核酸檢測。由于技術優(yōu)勢明顯，qPCR的應用范圍很廣。由于qPCR已經(jīng)存在了足夠長的時間，各項研究早已證明了它的可靠性和穩(wěn)健性。同樣，qPCR循環(huán)器的制造商已開發(fā)了配套的平臺，液體處理自動化設備的供應商也開發(fā)了兼容qPCR的自動化解決方案。
常見的是qPCR在分子診斷中的應用，它正在慢慢取代傳統(tǒng)方法（顯微鏡圖像）。它被用來檢測、識別和量化導致疾病的微生物（細菌、病毒和真菌）。有了qPCR，人工勞動減少了。它可以實現(xiàn)在短時間內處理大量的樣品（每次運行多達384或者甚至1536個反應），是診斷實驗室中不可替代的方法。但必須指出的是，該方法只檢測微生物的DNA或RNA的存在，而不能檢測其生存能力。因此，有時仍然需要傳統(tǒng)的微生物學技術與之配合。此外qPCR另外一個非常重要的應用領域是基因表達研究，它可以幫助我們了解生物學、微生物學、醫(yī)學和其他生命科學的各個領域。
