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第 8 / 9 頁
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DNA復制、損傷與修復
在細胞分裂過程中,親代細胞所含的遺傳信息完整地傳遞到兩個子代細胞,其中的DNA在傳代時完整地復制成兩份,這個過程稱為DNA復制。復制是嚴格按照A與T配對和G與C配對的規(guī)律進行的,通常有高度的...
2017-01-04
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分子生物學基本理論
分子生物學基本理論一、核酸是遺傳物質(zhì)核酸是遺傳物質(zhì)。核酸被分為核糖核酸(RNA)和脫氧核糖核酸(DNA)。DNA是一種由四種單核苷酸組成的高分子單鏈化合物,并由兩條單鏈嚴格按A與T配對和G與C配對的...
2017-01-03
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1029
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[原理]
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梯度離心技術(shù)
梯度離心是待分離的物質(zhì)在具有密度梯度的介質(zhì)中進行的離心。梯度離心可分為兩種,即密度梯度離心(又稱沉降速度離心、速度區(qū)帶離心或差速區(qū)帶離心)和平衡密度梯度離心(等密度梯度離心和沉降平衡離...
2017-01-03
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1152
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[原理]
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離心技術(shù)的應(yīng)用
根據(jù)應(yīng)用目的不同,離心機有分析用和制備用兩種。分析用超速離心機僅能對小樣品(小于1ml)進行分析(如分子量的測量);制備用離心機是為提取、純化大分子組分設(shè)計的,可對10~2000ml的樣品進行分離。...
2016-12-29
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[應(yīng)用]
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離心技術(shù)的基本原理
基本原理物體圍繞中心軸旋轉(zhuǎn)時會受到離心力F的作用。當物體的質(zhì)量為M、體積為V、密度為D、旋轉(zhuǎn)半徑為r、角速度為(弧度數(shù)/秒)時,可得:F=M2r或者F=VD2r上述表明:被離心物質(zhì)所受到的離心力與該物...
2016-12-28
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487
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[原理]
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高效毛細管電泳類型及應(yīng)用
(1)毛細管區(qū)帶電泳毛細管區(qū)帶電泳法(CapillaryZoneElectrophoresis,CZE)的分離是基于組分淌度的區(qū)別。一般毛細管內(nèi)壁帶負電荷,電滲流從陽極移動至陰極,流出順序是陰離子中性分子陽離子。若毛...
2016-12-26
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高效毛細管電泳的基本原理
高效毛細管電泳(HighPerformanceCapillaryElectrophoresis,HPCE)和一般電泳法的區(qū)別在于使用毛細管柱。在熔融石英毛細管內(nèi)壁覆蓋一層硅氧基(Si-O)陰離子,由于吸引了溶液中的陽離子,由此在毛細...
2016-12-23
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1562
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[原理]
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聚丙烯酰胺凝膠電泳
1、聚丙烯酰胺的合成和結(jié)構(gòu)聚丙烯酰胺凝膠是由丙烯酰胺(Acrylamide簡寫為Acr)和交聯(lián)劑甲叉雙丙烯酰胺(N,N1-methylene-bisacrylamide,簡寫B(tài)is)在催化劑的作用下,聚合交聯(lián)成含有酰胺基側(cè)鏈的脂...
2016-12-22
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1923
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電泳技術(shù)的種類
電泳技術(shù)的種類很多。根據(jù)有無固體支持物,可分為兩大類,即界面電泳和區(qū)帶電泳。界面電泳是指在溶液中進行的電泳,沒有固體支持物。當溶液中有幾種帶電粒子時,通電后,由于不同粒子泳動速度不...
2016-12-21
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1082
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[原理]
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電泳技術(shù)Techniques in Electrophoresis
一、基本概念目前電泳技術(shù)已被廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)、核酸和氨基酸等物質(zhì)的分離和鑒定。何謂電泳?在溶液中,帶電粒子在外加電場的作用下,向相反電極方向移動的現(xiàn)象,稱為電泳。電泳時不同的帶電粒子...
2016-12-20
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624
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親和層析原理(Affinity Chromatography)
親和層析法是近年來廣為重視并得到迅速發(fā)展的提純、分離方法之一。許多物質(zhì)都具有和某化合物發(fā)生特異性可逆結(jié)合的特性。例如:酶與輔酶或酶與底物(產(chǎn)物或競爭性抑制劑等),抗原與抗體,凝集素與...
2016-12-19
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1391
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凝膠過濾技術(shù)(Gel filtration technology)
凝膠過濾是利用具有一定口徑范圍的多孔凝膠的分子篩作用對生物大分子進行分離的層析技術(shù)。當樣品隨流動相經(jīng)過由凝膠組成的固定相時,分子量大的物質(zhì)不能擴散進入凝膠顆粒內(nèi)部,于是隨流動相流經(jīng)...
2016-12-16
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1156
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離子交換層析基本操作方法
離子交換層析(Ion-exchangeChromatography)離子交換層析是利用離子交換劑對需要分離的各種離子具有不同的親和力(靜電引力)而達到分離目的的層析技術(shù)。離子交換層析的固定相是離子交換劑,流動相...
2016-12-14
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4601
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分配層析原理 Distribution Chromatography
分配層析是利用混合物中各組分在兩相中分配系數(shù)不同而達到分離目的的層析技術(shù),相當于一種連續(xù)性的溶劑抽提方法。在分配層析中,固定相是極性溶劑(例如水、稀硫酸、甲醇等)。此類溶劑能和多孔的...
2016-12-13
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15284
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[原理]
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吸附層析技術(shù)的簡介及原理
層析技術(shù)是近代生物化學實驗中常用的分析方法。任何層析過程都是在兩個相中進行的。一是固定于支持物上的固定相,另一是流經(jīng)固定相的流動相,由于樣品中各組分理化性質(zhì)(如溶解度、吸附能力、分子...
2016-12-12
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5637
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[原理]
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幾種常用的國產(chǎn)分光光度計
(一)721型分光光度計(圖2-5)這是一種采用光電管為受光器的較高級可見光分光光度計。由穩(wěn)壓電源供電的光源燈發(fā)出穩(wěn)定的白光。如圖2-5所示。光線經(jīng)反射鏡投入狹縫,再經(jīng)準直鏡反射進入棱鏡,在棱鏡...
2016-12-08
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9643
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分光光度計的結(jié)構(gòu)原理
不論光度計(Photometer)、比色計(Colorimeter)還是分光光度計(Spectrophotometer),其基本結(jié)構(gòu)原理都是相似的,都由光源、單色光器、狹縫、吸收杯和檢測器系統(tǒng)等部分組成(圖2-3)。(一)光源一個良...
2016-12-06
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2173
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[原理]
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分光光度法Spectrophotometry基本原理
分光光度法Spectrophotometry基本原理光線是高速運動的光子流,也是具有波長和頻率特征的電磁波。光子的能量與頻率成正比,與波長成反比。肉眼可見的光線稱為可見光??梢姽庵徽茧姶挪ㄗV的很窄部...
2016-12-05
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974
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[原理]
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生物大分子制備原理
一、透析和超濾(DialysisandUltrafiltration)1、透析是利用蛋白質(zhì)等生物大分子不能透過半透膜而進行純化的一種方法。脫鹽透析是應(yīng)用最廣泛的一種透析方法。將含鹽的生物大分子溶液裝入透析袋內(nèi),...
2016-12-01
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845
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[原理]
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以蛋白質(zhì)為例的分離純化實驗
鹽析(Saltingout)鹽析方法是蛋白質(zhì)和酶提純工作中應(yīng)用最早,至今仍廣泛應(yīng)用的方法。其原理是蛋白質(zhì)在高濃度的鹽溶液中,隨著鹽濃度的逐漸增加,蛋白質(zhì)表面的電荷被中和,水化膜被破壞,蛋白質(zhì)分...
2016-11-30
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634
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[維修]
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生物大分子的基本制備技術(shù)
生物大分子的基本制備技術(shù)生物大分子的制備過程包括選材、細胞破碎和細胞器分離、生物大分子提取純化、以及樣品濃縮干燥和儲存等。生物大分子的制備是一項十分細致的工作,既要設(shè)法得到它們的純...
2016-11-29
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548
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[維修]
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核酸的鑒定、保存與應(yīng)用
(一)核酸的鑒定1.濃度鑒定核酸濃度的定量鑒定可通過紫外分光光度法與熒光光度法進行。(1)紫外分光光度法:紫外分光光度法是基于核酸分子成分中的堿基均具有一定的紫外線吸收特性,最大吸收波長在...
2016-11-28
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1437
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[維修]
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核酸分離與純化的技術(shù)路線設(shè)計
(一)核酸的釋放正常情況下,無論是DNA還是RNA均位于細胞內(nèi),因此核酸分離與純化的第一步就是破碎細胞、釋放核酸。細胞的破碎方法非常多,包括機械法與非機械法兩大類。機械法又可分為液體剪切法...
2016-11-25
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1164
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[維修]
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核酸分離與純化的設(shè)計與原則
細胞內(nèi)的核酸包括DNA與RNA兩種分子,均與蛋白質(zhì)結(jié)合成核蛋白(nucleoprotein)。DNA與蛋白質(zhì)結(jié)合成脫氧核糖核蛋白(deoxyribonucleoprotein,DNP),RNA與蛋白質(zhì)結(jié)合成核糖核蛋白(ribonucleoprotein...
2016-11-24
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561
次
[原理]
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細胞因子的檢測方法
細胞因子(cytokine)是由細胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物質(zhì)的統(tǒng)稱。在免疫應(yīng)答過程中,細胞因子在免疫調(diào)節(jié)、炎癥應(yīng)答、腫瘤轉(zhuǎn)移等生理和病理過程中起重要作用。細胞因子的檢測不僅是基礎(chǔ)免...
2016-11-23
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661
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[應(yīng)用]
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H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)滲入法實驗步驟
一、操作方法1、培養(yǎng)液中按1%的體積加雙抗(含青霉素1萬U/ml,鏈霉素0.01g/ml)及肝素液(含肝素100U/ml)。用3.5%NaHCO3液調(diào)pH值為7.2~7.4,然后加滅活的小牛血清,使?jié)舛葹?0%。再加PHA(50U~75U/m...
2016-11-22
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1534
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[應(yīng)用]
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細胞增殖檢測:H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)滲入法
一、實驗原理:T細胞、B細胞表面具有識別抗原的受體和有絲分裂原受體,在特異性抗原刺激下可使相應(yīng)淋巴細胞克隆發(fā)生增殖。植物血凝素(PHA)、刀豆蛋白A(ConA)、抗CD2和抗CD3McAb作為多克隆刺激劑...
2016-11-22
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1112
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[應(yīng)用]
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血清蛋白瓊脂糖凝膠電泳原理
瓊脂糖(agarose)是經(jīng)過挑選,以質(zhì)地較純的瓊脂(agar)作為原料而制成的。瓊脂在化學上是由瓊脂糖和瓊脂膠組成的復合物。瓊脂膠是一含有硫酸根和羥基的多糖,它具有離子交換性質(zhì),這種性質(zhì)會給電泳...
2016-11-18
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859
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[原理]
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血清蛋白瓊脂糖凝膠電泳實驗操作方法
【試劑】1、蘇丹黑染色液將蘇丹黑B加到無水乙醇中至飽和,搖蕩使乙?;S们斑^濾。上海創(chuàng)賽科技提供4197-25-5,蘇丹黑B,GR,商品編號:D16-1032969-100G,價格431元。2、巴比妥緩沖液稱取巴比...
2016-11-18
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990
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[應(yīng)用]
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多因素值得注意 如何讓你的qPCR更完美
RNA抽提關(guān)于RNA抽提,各個學術(shù)團體和科研機極使用不同的操作流程,但下列因素是值得注意的事情:1、不同方式保存的及不同形態(tài)的樣品的RNA提叏方法有所差別;2、分離總RNA,或是大小片殌RNA時提叏方...
2016-11-17
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627
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[應(yīng)用]
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規(guī)范操作 避免PCR反應(yīng)污染方法
PCR反應(yīng)常見的污染表現(xiàn)為:標本間交叉污染,PCR試劑污染、PCR擴增產(chǎn)物污染以及實驗中兊隆質(zhì)粒的污染。為了有效地避克這些污染,使得實驗的結(jié)果更準確、更直觀:1.合理分隔實驗室將樣品的處理、配...
2016-11-16
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739
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[應(yīng)用]
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實時熒光定量PCR技術(shù)
實時熒光定量PCR技術(shù)(Real-timeqPCR)是一種在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,最后通過特定數(shù)學原理對未知模板進行定量分枂的方法。因其定量準確、特異性強、操...
2016-11-11
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1014
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[方案]
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ES細胞的凍存方法
操作方法1.常規(guī)方法將細胞消化成單細胞懸液;2.轉(zhuǎn)入試管,1000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘;3.配適量凍存液(為含10%二甲亞砜(DMSO),10%FBS的DMEM培養(yǎng)液);上海創(chuàng)賽科技提供67-68-5,二甲亞砜,DimethylSulfo...
2016-11-09
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553
次
[維修]
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ES細胞的復蘇方法
1.提前制備好相應(yīng)數(shù)量的Feeder;2.準備37-39℃的熱水,從液氮罐中取出所需凍存管(凍存細胞),迅速投入熱水中,迅速劇烈搖動直至凍存液全部融化;上海創(chuàng)賽科技提供細胞凍存管,F(xiàn)reezingTubes,商品...
2016-11-08
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659
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[維修]
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如何查找連續(xù)的mRNA、cDNA、蛋白序列
如何查找連續(xù)的mRNA、cDNA、蛋白序列(以人類的IL6為例)1、進入NCBI主頁:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/在search后面選擇Gene,在for后面填寫需要查找的基因的名字。如圖所示:點擊Go,出現(xiàn)以下界...
2016-10-28
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1463
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[維修]
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由于培養(yǎng)基用途的不同,培養(yǎng)基可以分為哪幾類?
由于培養(yǎng)基用途的不同,培養(yǎng)基可以分為哪幾類?(1)選擇性培養(yǎng)基:在培養(yǎng)基中加入某種化學物質(zhì),以抑制不需要的微生物的生長,促進所需要的微生物生長(2)鑒別培養(yǎng)基:在培養(yǎng)基中加入某種指示...
2016-08-11
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1893
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[企業(yè)]
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豚鼠白介素12B(IL12B)ELISA試劑盒
豚鼠白介素12B(IL12B)ELISA試劑盒本試劑盒僅供研究使用。豚鼠白介素12B(IL12B)ELISA試劑盒使用目的:本試劑盒用于測定血清、血漿及相關(guān)液體樣本中待測物質(zhì)的含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾...
2016-08-10
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481
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[維修]
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豚鼠白介素2(IL2)ELISA試劑盒
豚鼠白介素2(IL2)ELISA試劑盒本試劑盒僅供研究使用。豚鼠白介素2(IL2)ELISA試劑盒使用目的:本試劑盒用于測定血清、血漿及相關(guān)液體樣本中待測物質(zhì)的含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定...
2016-08-10
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422
次
[維修]
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elisa試劑盒為什么要用血清檢測?
elisa試劑盒為什么要用血清檢測?ELISA其實是可以測一些組織、細胞等樣本的,但是由于組織、細胞是固體樣本,要對其進行破碎,提取被檢物質(zhì);而在提取被檢物質(zhì)時破碎方式(如機械破碎、超聲破碎、裂解...
2016-08-05
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668
次
[原理]
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ELISA試劑盒有哪些優(yōu)點與服務(wù)承諾?
ELISA試劑盒有哪些優(yōu)點與服務(wù)承諾?elisa試劑盒的優(yōu)點:一、高效、靈敏、特異的抗體;二、穩(wěn)定的重復性和可靠性;三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;四、適用血清、血漿、組織勻漿液...
2016-08-05
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